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熒光-PCR法的檢測局限性體現(xiàn)在哪些方面
動物源性成分廣泛分布于食品、飼料、化妝品等，與人們的生活息息相關(guān)，其中食品和飼料所占的比例大。肉及肉制品摻假成為世界各國共同關(guān)注的熱點問題，肉食品及其飼料的安全隱患直接關(guān)系到人類的安危。近幾十年來，以PCR技術(shù)為核心的動物源性成分檢測獲得了廣泛應(yīng)用。
檢測方法的局限性：
1）樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān)；
2）樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
3）陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
4）病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
5）不同的提取方法存在提取效率差異，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
6）試劑運輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；
7）本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
注意事項：
1）所有操作嚴(yán)格按照說明書進行；檢驗過程中，參照《GB/T 27403實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測》的規(guī)定進行；
2）試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；
3）反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
4）反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
5）使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服；
6）樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；
7）實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
8）試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理。