口蹄疫O型正向血凝抗體檢測試劑盒檢驗步驟和方法
口蹄疫O型正向血凝抗體檢測試劑盒由預包被口蹄疫O型抗體的酶標板、抗體工作液、抗原液酶標記物及其他配套試劑組成,應用阻斷酶聯免疫法(ELISA)原理檢測牛、羊、豬血清樣本中口蹄疫O型抗體。用于檢測牛、羊、豬血清中口蹄疫O型抗體,可用于口蹄疫O型疫苗免疫效果評價及輔助診斷。
口蹄疫O型正向血凝抗體檢測試劑盒檢驗步驟和方法:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘以上,恢復至室溫(20-25℃)。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。并用稀釋好的洗滌液清洗兩遍。
3.空白對照孔加樣品稀釋液50 μL;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50 μL;每個孔中加入50μL的酶標記物,輕微震蕩混合均勻,37℃孵育30分鐘。
4.棄去反應液,每孔加入200μL洗滌液,無需靜置,甩掉孔中洗滌液,重復清洗5遍,最后在干凈的吸水紙上拍干。
5.每孔加入底物液100μL,室溫避光顯色15分鐘。
7.每孔加入終止液50 μL,混勻,在10分鐘內,用450 nm波長(可用630 nm作參比波長)測定各孔吸光值(OD值),無參比波長用空白孔調零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。