8
13365216078
當前位置：首頁>>技術中心>>技術文章>>使用超濾離心管時所需要注意的事項
在線溝通：
唐蘇強 （銷售經(jīng)理）
- 電話：
- 手機：
- 13365216078
- 售后電話：
- 13365216078
- 傳真：
- 聯(lián)系我時，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個性化：
- www.lvmengyq.com
- 手機站：
- m.lvmengyq.com
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://www.js967.com/st392766/
- 公司網(wǎng)站：
- http://www.gmhplc.com/
使用超濾離心管時所需要注意的事項
閱讀：4138發(fā)布時間：2021-1-20
（1）選擇合適的超濾離心管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的產(chǎn)品。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。
?。?）新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕，加入蛋白液前，需要插在冰上預冷。
?。?）平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。不同離心機的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后，有所不同。離心機的加速度調(diào)至低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機，否則離心機出問題時，無法馬上處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
?。?）當濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要準確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾離心管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
以上就是小編今天為大家?guī)淼娜抠Y料，希望能夠讓您更好的了解本產(chǎn)品。
江蘇綠盟科學儀器有限公司主營產(chǎn)品：泵保護過濾器-溶劑抽濾瓶-固相萃取儀裝置
化工儀器網(wǎng) 設計制作，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://www.js967.com, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責，化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風險，建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
