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培養凍存的細胞具體過程

閱讀:1418          發布時間:2021-10-8

培養凍存的細胞具體過程:

(1) 將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。

(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉,直到管內物體*融化。

(3) 將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉入無菌環境。

(4) 用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。

(5) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負壓,開蓋時可能會有少量溢出,這是正?,F象)。

(6) 用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。

(7) 蓋好培養瓶的蓋子,輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。

(8) 將培養瓶放入培養箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)

(9) 放入培養箱后第6-16小時更換一次培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。



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