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兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒注意事項和實驗原理

閱讀:1179          發布時間:2019-1-30

兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒  注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值

大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計

算時請Zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。  

兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒   實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)水平。用純化的兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65),再與HRP 標記的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)濃度。

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