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大腸桿菌專用破菌液,代替超聲破菌

2023-4-23  閱讀(461)

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對于做重組蛋白原核表達(大腸桿菌E.coli系統)的小伙伴們,破菌是必需的的流程之一,目前用到的通用方法是用超聲儀進行超聲破菌。但是如果實驗室沒有超聲儀,或者收集的菌量比較少,就可以選擇賽爾瑞成的大腸桿菌專用破菌液。

大腸桿菌專用破菌液

產品優勢

1. 節省成本

只需將菌體與破菌液簡單混勻,然后凍融即可,不需要超聲儀就能使菌體破碎,釋放可溶上清。節省儀器成本和人力成本。

2. 組成成分溫和

不含還原劑、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分,對絕大多數蛋白結構和活性無影響。

3. 使用搭配靈活

可搭配賽爾瑞成超級核酸酶(貨號:CR1001),降解菌體裂解后的核酸,以降低破菌液粘度,以利于后續操作;也可以根據需要添加蛋白酶抑制劑、還原劑、NaCl等成分。

使用方法

以菌體(g)/化學破菌液(ml)=1:30(或1:10至1:50之間)比例加入大腸桿菌專用破菌液,打散混勻,置于-20°C以下冰箱,待冷凍結實。需要破菌時取出自然解凍,然后按常規方法高速冷凍離心,收取破菌上清和菌體沉淀。

數據對比

電泳對比圖2.png

注: 1:大腸桿菌專用破菌液破菌上清 2:大腸桿菌專用破菌液破菌沉淀

3:超聲破菌破菌上清 4:超聲破菌破菌沉淀

M:蛋白Marker


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搭配賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基,讓重組蛋白原核表達更簡單更方便!

多培®大腸桿菌高密度表達培養基是賽爾瑞成研發的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達的即用型全成分培養基。使用該培養基,只需一步操作,無需添加IPTG誘導劑,即可收獲含表達蛋白的菌體,與常規方法相比,對絕大多數蛋白表達,其菌體生物量和對應的目的蛋白都明顯提高數倍以上。

賽多培培養基操作流程對比圖.png




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