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技術文章

LC/MS/MS液質聯用儀法定量分析全氟辛酸

閱讀:1410          發布時間:2023-5-4

 摘要建立了用Agilent 6410三重串聯四極桿質譜儀分析全氟辛酸(PFOA)的方法。在一根快速分離高通量C18柱(粒徑1.8 µm)上,用含有10 mM醋酸銨的水和甲醇為流動相,進行簡單的等度洗脫,PFOA的保留時間僅為2.3分鐘。在從9 fg/µL到150 pg/µL 4個數量級的范圍內呈良好的線性,9 fg/µL濃度水平上的峰面積重現性好,RSD為5.5 %,該濃度下的平均信噪比(S/N)為7.2。相當于檢測地表水提取物所需要的靈敏度。


引言全氟辛酸(PFOA)是合成的化學物質,不是天然存在的。各公司使用PFOA制造含氟聚合物,這些聚合物是應用價值的物質,具有阻燃、抗油、防污、防油脂等特點。毒理學研究表明,接觸PFOA可引發生殖/發育毒性、肝損傷,并可能致癌。PFOA在環境中長期存在,已經發現在環境和普通美國人群的血液中都有低水平含量的PFOA。EPA近期研究表明,需要加強測試和監測PFOA的量。歐盟要求飲用水中PFOA < 100 ppt。在本研究中,測定了濃度范圍從9 fg/µL到150 pg/µL的PFOA標準溶液,校正曲線的線性相關系數為R2 >0.997。到1,500 pg/µL濃度水平時不再呈線性。9 fg/µL濃度連續進樣6次測定重復性。最濃度下根據所測的峰面積計算得到的RSD為5.5%。進樣體積為10 µL,因此這一低濃度的進樣量僅為90 fg。PFOA的結構式如下所示:CF3 – (CF2)6 – COOH該分子為羧酸,電噴霧電離(ESI)負離子模式應有較高的靈敏度。


實驗部分樣品制備PFOA母液濃度為1,500 ng/µL。用甲醇稀釋成0.009、0.015、0.15、0.45、0.75、1.5、15.0、150和1,500 pg/µL一系列濃度。LC/MS 方法結果與討論圖1是校正曲線。測定濃度(9 fg/µL)重復進樣9次。15 fg/µL濃度也重復進樣9次。如圖2所示,濃度為9 fg/µL時,峰面積重復性為5.5% RSD。定義1到1.5分鐘內為噪音,該濃度下的信噪比為7.2。LC條件Agilent 1100 系列二元泵、脫氣機、多孔板進樣器和柱溫箱。色譜柱: Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHT C18,2.1 mm × 100 mm, 1.8 µm (部件號 959764-902)柱溫: 40 °C流動相: A = 10 mM 醋酸銨水溶液,B = 10 mM 醋酸銨溶于80:20甲醇/水流速: 0.3 mL/min進樣量: 10 µL等度: 85% B停止時間: 3 分鐘針頭清洗: 75:25 甲醇/水;沖洗10 秒MS條件離子化模式: Agilent G1948B離子源,ESI負離子模式霧化器: 35 psig干燥氣流速: 10 L/min干燥氣溫度: 300 °CVcap: 4,000 V分辨率 (FWHM): Q1 = 0.7 amu; Q2 = 0.7 amuMRM transition: m/z 413.0 > 369.0碰撞誘導解離電壓: 67 V碰撞能量: 3 V駐留時間: 200 msec


將1,500 pg/µL濃度添加到校正曲線中,就會看到圖3中的結果,需要對數據進行2次曲線擬合。但可以看出,其相關系數良好R2 > 0.99999。


結論全氟辛酸化合物對負離子電噴霧電離模式非常敏感。標準液在9 fg/uL到150 pg/µL范圍內顯示了非常好的線性,相當于柱上進樣量在90 fg到1.5 ng之間。在9 fg/µL測定的低濃度下峰面積的重復性為5.5%RSD,這個濃度下連續進樣的平均信噪比為7.2。可以看出1,500 pg/µL,或柱上15 ng時出現信號飽和。由于飲用水是比較干凈的基質,預計測定實際樣品時也能達到類似的靈敏度

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