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蛋白純化是利用蛋白質(zhì)之間在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異，如分子量大小、電荷、溶解度、疏水性、親和性等，通過逐步進(jìn)行層析、沉淀、電泳等步驟，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的純化。
主要有：
1、體積排除色譜；
2、親和層析法；
3、離子交換層析法;
4、電泳法等。
在實(shí)際操作中，通常需要根據(jù)目標(biāo)蛋白的性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)需求，靈活選擇并組合使用不同的分離純化方法，以形成分步分離純化的策略，以達(dá)到更高的純度和產(chǎn)量。
在實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)中，經(jīng)常需要同時(shí)處理多個(gè)蛋白樣品。如在藥物研發(fā)過程中，需要大量制備高純度、高活性的藥物蛋白。這些蛋白可能是藥物本身，也可能是藥物研發(fā)的重要靶標(biāo)或工具。通過高通量純化，可以加速藥物候選物的篩選和驗(yàn)證過程，提高藥物研發(fā)的成功率。在生物治療領(lǐng)域，如基因治療、細(xì)胞治療等，需要制備高質(zhì)量的生物制劑。這些制劑需要高純度和高活性，以確保治療的安全性和有效性。高通量純化技術(shù)能夠滿足這些要求，為生物治療提供有力支持。但是使用手動(dòng)操作進(jìn)行高通量純化實(shí)驗(yàn)不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且容易引入人為誤差，在手動(dòng)實(shí)驗(yàn)過程中，交叉污染也是一個(gè)需要重點(diǎn)關(guān)注的問題。
瑞孚迪（Revvity）的自動(dòng)化移液工作站能夠并行處理多個(gè)樣品，大幅提高純化效率，同時(shí)還可以解決手動(dòng)進(jìn)行高通量蛋白純化所遇到的所有難點(diǎn)。工作站通過精確編程和傳感器控制，可以實(shí)現(xiàn)高精度的移液操作，減少體積誤差，這對(duì)于需要嚴(yán)格，控制反應(yīng)物比例的純化步驟尤為重要；通過程序控制操作過程，減少了人為因素帶來的誤差；通過一次性吸頭、自動(dòng)清洗等功能，降低了交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。
圖1
在實(shí)際實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)過程中，我們可以根據(jù)所需純化的樣品體積與樣品數(shù)量來選擇自動(dòng)化方案。圖1所描述的多種自動(dòng)化純化方案均可在瑞孚迪自動(dòng)化移液工作站中實(shí)現(xiàn)。
Janus G3平臺(tái)
Fontus平臺(tái)
在完成高通量蛋白純化后，還可使用Labchip GXII進(jìn)行蛋白分析。
•LabChip GXII Touch 24：低通量（1-24個(gè)樣本/run）
LabChip GXII Touch HT：高通量（1-96或384個(gè)樣本/run）
•基于微流控毛細(xì)管 Lab-on-Chip 技術(shù)
上樣、分離、染色脫色、檢測(cè)、清洗、分析自動(dòng)化
速度快：28-80s/sample
基于微流控毛細(xì)管 Lab-on-Chip 技術(shù)
•生物大分子藥物研發(fā)和生產(chǎn)過程的篩選與質(zhì)控
抗體及其他生物類似物的濃度、純度、糖基化、聚合等指標(biāo)分析
蛋白質(zhì)大小及定量
蛋白表達(dá)和優(yōu)化
單克隆抗體生產(chǎn)
重組蛋白定量
糖譜分析
