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未來已來 | 單細胞柔性分選系統(tǒng)Pala
在藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的動態(tài)過程中，從開創(chuàng)性研究到工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，效率以及數(shù)據(jù)的可靠性是每個階段的驅(qū)動力。盡管技術(shù)進步為當今藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的各個方面增添了光彩，但挑戰(zhàn)仍然存在，需要更新工具和技術(shù)來加快這一進程。那么在細胞系開發(fā)中，特別是單克隆分離方面，我們該如何應(yīng)對這些挑戰(zhàn)？
1.什么是單克隆分離?
單克隆是指基因相同的細胞群，也意味著它們需要來源于同一個細胞。經(jīng)過工程改造的細胞群需要進行單獨分析并分選，這一過程也被稱為單克隆分離，是確保遺傳同致性的基本步驟。單克隆分離也驗證了引入的基因改變和觀察到的表型之間的關(guān)系，并為后續(xù)步驟提供了可靠的基礎(chǔ)。
2.單克隆分離的現(xiàn)有技術(shù)和挑戰(zhàn)
流式細胞分選(FACS)和有限稀釋法是兩種常用的單克隆分離技術(shù)。FACS是根據(jù)細胞的熒光特性分選細胞。一旦細胞被熒光標記物標記，將其引入到FACS儀器中，并根據(jù)特定的標準測量其熒光強度，從而決定是否分選細胞。值得注意的是，F(xiàn)ACS的分選過程是在高壓(30-70 psi)和高速流動下進行的，可能會導(dǎo)致細胞損傷和應(yīng)激反應(yīng)，從而影響分選后細胞的存活率1。另外，流動池和管路的尺寸較小，堵塞也是傳統(tǒng)FACS長期存在的一個問題。管路疏通會占用儀器大量的操作時間，推遲整體的實驗計劃。而且在非無菌環(huán)境中共用流體管路來操作，會大大增加污染的風險。
有限稀釋法是一種更加溫和的技術(shù)，通過連續(xù)稀釋細胞懸液來降低細胞密度。雖然細胞不再受高壓力或依賴其熒光特性，但有限稀釋法是一個手動的勞動密集過程，極易出錯。而且有限稀釋法的單細胞沉降概率要遵循泊松分布，導(dǎo)致整體單細胞效率低且不可靠2。
3.全自動柔性單細胞分離儀Pala的優(yōu)勢
Pala單細胞分離儀是專門應(yīng)對上述挑戰(zhàn)而設(shè)計的。結(jié)合微流控技術(shù)、流式細胞術(shù)和液滴分配技術(shù)，在＜2psi的低壓下對細胞進行分選，可分別在1分鐘和6分鐘內(nèi)將細胞分選到96或384孔板中。在節(jié)省大量分選時間的同時獲得健康且有活力的細胞。
Pala單細胞分離儀保證了較高的單細胞效率，單細胞入孔率超過90%。自動化設(shè)計使得操作簡單直觀，不需要專門的操作人員和大量的應(yīng)用培訓。小巧輕便的設(shè)計允許其可以在超凈臺內(nèi)完成操作，一次性細胞芯片避免了樣本間的交叉污染。
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