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單細(xì)胞測(cè)序是一種高效的檢測(cè)技術(shù)
閱讀：559 發(fā)布時(shí)間：2021-3-17
單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)又稱“下一代“測(cè)序技術(shù)或深度測(cè)序技術(shù)，可以一次性對(duì)幾十萬(wàn)至幾百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用在基因組測(cè)序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。
測(cè)序技術(shù)的突出優(yōu)點(diǎn)是可以從細(xì)胞圖譜的角度，探測(cè)細(xì)胞特異性以及細(xì)胞間的差異，探索細(xì)胞間的協(xié)同運(yùn)作方式，研究組織異質(zhì)性問(wèn)題，根據(jù)細(xì)胞層面的特征對(duì)疾病進(jìn)行深度刻畫(huà)，能有效地解決組織樣本無(wú)法破解的細(xì)胞異質(zhì)性難題，有助于發(fā)現(xiàn)新的細(xì)胞類型。
基于大量的單細(xì)胞基因表達(dá)數(shù)據(jù)，該平臺(tái)還可進(jìn)行細(xì)胞表達(dá)特征聚類、亞群表達(dá)特征、標(biāo)志物篩選等方面的分析，是一種高效的細(xì)胞基因表達(dá)水平的檢測(cè)技術(shù)，在發(fā)育與生殖、免疫、干細(xì)胞分化、腫瘤異質(zhì)性、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育以及腦發(fā)育等研究領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
單細(xì)胞測(cè)序能為單細(xì)胞中每個(gè)轉(zhuǎn)錄本標(biāo)記特異性分子標(biāo)簽，實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平上基因表達(dá)譜的定量。同時(shí)，每個(gè)細(xì)胞也會(huì)被標(biāo)記特異性細(xì)胞標(biāo)簽，使得高通量平行建庫(kù)成為可能。結(jié)合單細(xì)胞分離技術(shù)，單次實(shí)驗(yàn)可制備100-10000個(gè)單細(xì)胞文庫(kù)，用戶可根據(jù)需求定制引物，將檢測(cè)范圍集中在目標(biāo)基因，大幅降低后續(xù)測(cè)序成本。
測(cè)序的工作流程包括4個(gè)關(guān)鍵步驟：1) 單細(xì)胞制備，2）單細(xì)胞分離和文庫(kù)制備，3）測(cè)序和初級(jí)分析，4）數(shù)據(jù)可視化與解讀。在整個(gè)工作流程中，有一些影響結(jié)果并決定研究能否成功的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)和關(guān)鍵步驟。想要獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，得出有意義的結(jié)論，需要精心設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并按要求開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。
在上述步驟中，單細(xì)胞分離的過(guò)程往往會(huì)對(duì)單細(xì)胞測(cè)序的最終結(jié)果產(chǎn)生重大影響。單細(xì)胞分離過(guò)程太長(zhǎng)或者分離時(shí)對(duì)細(xì)胞的損傷太大，都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞最終的活性狀態(tài)受到較大影響。活性較差的細(xì)胞在后續(xù)的單細(xì)胞測(cè)序中，很難獲得較好的數(shù)據(jù)結(jié)果。
Namocell為單細(xì)胞測(cè)序提供了更好的單細(xì)胞分離解決方案。它能幫助用戶快速、高效、輕柔地分選單個(gè)目的細(xì)胞。儀器配備的散射光和熒光檢測(cè)系統(tǒng)，可以精確識(shí)別用戶感興趣的目的細(xì)胞，減少后續(xù)其他細(xì)胞的數(shù)據(jù)干擾；快速分選單細(xì)胞，最快完成一塊96孔板的分選時(shí)間不到1min；系統(tǒng)內(nèi)部壓力不到2psi，分離過(guò)程輕柔，減少細(xì)胞在分選過(guò)程中的損傷，保證細(xì)胞活性。