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上海單細(xì)胞分離巧妙的新方法在不斷涌現(xiàn)
閱讀：626 發(fā)布時(shí)間：2019-6-25
上海單細(xì)胞分離巧妙的新方法在不斷涌現(xiàn)
上海單細(xì)胞分離是單細(xì)胞研究中困難的步驟之一，目前的單細(xì)胞分離策略主要分為三類(lèi)：手動(dòng)分離、熒光激活的細(xì)胞分選和微流體技術(shù)。
在進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析之前，我們需要確定自己拿到了正確的細(xì)胞。如果你想要的細(xì)胞已經(jīng)處于懸浮狀態(tài)（比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞），而且含量相對(duì)比較豐富，那么流式細(xì)胞分析將是你的理想選擇。如果樣本是實(shí)體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細(xì)胞外蛋白。不過(guò)酶學(xué)消化對(duì)細(xì)胞影響較大，甚至可能改變基因轉(zhuǎn)錄情況。把組織細(xì)胞制成懸液之后，我們就可以通過(guò)特異性的熒光標(biāo)簽分離出自己想要的細(xì)胞。進(jìn)一步拿到單細(xì)胞是比較棘手的一步，可能需要用到微流體設(shè)備。
將細(xì)胞分散到懸液中，會(huì)失去它們?cè)诮M織里的位置信息。如果你想要了解單細(xì)胞所處的環(huán)境，就得使用激光捕獲顯微切割技術(shù)，上海單細(xì)胞分離通過(guò)掃描組織切片定位目的細(xì)胞，并將其提取出來(lái)。操作者需要非常小心，以免切到細(xì)胞或細(xì)胞核。數(shù)量為的細(xì)胞只能用毛細(xì)管等器具手動(dòng)獲取。離法的難度與細(xì)胞或個(gè)體的大小成反比，較大的微生物如藻類(lèi)、原生動(dòng)物較容易，個(gè)體較小的細(xì)菌則較難。
在顯微鏡下使用單孢子分離器進(jìn)行機(jī)械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來(lái)，然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。上海單細(xì)胞分離對(duì)操作技術(shù)有比較高的要求，多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究中采用。當(dāng)然，除了成熟的方法，巧妙的新方法也在不斷涌現(xiàn)，能以更高的準(zhǔn)確性和特異性來(lái)分離單細(xì)胞。