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FITC-Phalloidin是一種熒光標記的鬼筆環肽（Phalloidin）試劑
閱讀：136 發布時間：2025-3-26理論分析：
英文名：FITC-Phalloidin
分子式：C56H60N10O15S2
分子量：1177.26
產品詳情：
規格：10mg、25mg、50mg 等
貨期：根據具體的產品而定
純度：95%+
用途：實驗用途，科學研發，可定制服務
儲存條件：干燥、避光，短期（數天至數周）在 0 - 4 C 或長期（數月至數年）-20 C。
注意事項：所有的試劑不可用于臨床，不可用于食用，人體。
產品應用：
FITC-Phalloidin 是一種熒光標記的鬼筆環肽（Phalloidin）試劑，常用于細胞生物學和組織學研究中，用于特異性標記和檢測細胞內的肌動蛋白絲（F-actin）。
鬼筆環肽（Phalloidin）是一種從毒蘑菇中提取的環狀七肽毒素，具有親和力和特異性，能夠選擇性地結合肌動蛋白絲（F-actin），而不會與單體肌動蛋白（G-actin）結合。FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種綠色熒光染料，通過化學鍵與鬼筆環肽結合后，可以用于熒光顯微鏡觀察。
細胞和組織染色：FITC-Phalloidin 可用于固定和透化的細胞或組織切片的熒光染色，用于觀察細胞骨架結構。
細胞形態學研究：通過標記 F-actin，可以研究細胞的形態變化、細胞遷移和細胞分裂等過程。
定量分析：可以用于定量分析細胞內 F-actin 的含量。
包裝：
使用方法：
一、工作液準備
1. 對于FITC標記鬼筆環肽（300T）
本品以溶于甲醇的20µM儲存液形式提供，總量為300µl。按照100 nM的工作液濃度來換算，可制備總量為60 ml的工作液。建議收到產品后，根據單次使用量，對母液進行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩定。
開始實驗前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現配現用。
2. 對于FITC標記鬼筆環肽（1mg
本品以凍干粉形式提供，分子量為1177.3，總量為1mg。可先用甲醇或者DMSO充分溶解配制成20~100µM的儲存液。如，加入8.494ml甲醇到1mg鬼筆環肽即得到100µM等量的儲存液，根據單次使用量，進行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩定。
開始實驗前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現配現用。
二、染色步驟
1. 細胞爬片生長24h，使其密度達到50%匯合度。
2. 吸掉培養液，37℃預熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。
3. 使用溶于PBS的4%甲醛溶液進行細胞固定，室溫固定10min。
※ 注意：避免固定劑中含有甲醇成分，因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。
4. 室溫條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10min。
5. 室溫條件下，用丙酮（≤-20℃）脫水或者用0.5% Triton X-100溶液透化處理5min。
6. 室溫條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10min。
7. 取200µl配制好的 FITC標記鬼筆環肽工作液，覆蓋住蓋玻片上的細胞，室溫避光孵育30min（通常情況下，4℃~37℃孵育皆可）。
注意：為了降低背景，可于FITC標記的鬼筆環肽工作液內加入1% BSA；另外，孵育過程中為了避免溶液揮發，可將蓋玻片轉移到一個密封的容器內。
8. 用PBS清洗蓋玻片3次，每次5min。
9. 使用200µl DAPI溶液（濃度：100 nM）對細胞核進行復染，約30s。
10. 用PBS清洗蓋玻片，然后倒置在已經滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片劑的載玻片上。使用紙巾輕輕檫掉多余封片劑，然后用指甲油封片。此法制備的標本玻片可置于4℃避光保存，通常6個月內可繼續做F-actin染色分析。
※ 注意：也可以直接使用含有DAPI的抗熒光淬滅封片劑，合并步驟9）10），簡化步驟。
11. 熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察，選擇FITC激發/發射濾片（Ex/Em=496/516nm）和DAPI激發/發射濾片（Ex/Em=364/454nm）。
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