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不同實驗對抗體有什么要求
閱讀：488 發布時間：2021-10-26科研工作離不開抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那么這幾種實驗技術都需要什么樣的抗體呢？
1.WB
WB的蛋白經過加熱變性之后都變成線性的結構。因此*好的抗體是采用非常特異序列的人工合成多肽的方法來做實驗，結果也非常特異。
2.IP/CHIP
我們用抗體去結合生理狀態下的蛋白質，因此IP的抗體最好使用純化的天然蛋白制作的抗體來做，也可以用純化的重組蛋白的抗體。最好不要用人工合成多肽制作的抗體，因為這種抗體識別的位點可能被深深地藏在了蛋白的內心深處。CHIP和IP沒有太大的區別，唯 yi 的問題在于，如果抗體識別的表位和該蛋白質與DNA結合的部位一致，則會導致CHIP實驗的失敗。
3. IF/IHC
免疫熒光和免疫組化中需要進行固定一步，固定是為了盡量讓細胞的形態結構維持和原有的一致。這種化學物質的固定使蛋白質變性凝固，與天然狀態下的蛋白質有了一定的區別，但是又不同WB中加熱變性變成了線性的結構。因此在做IF/IHC實驗中，最合適的抗體可以是純化的重組蛋白得到的抗體，也可以是人工合成多肽得到的抗體（多肽是在蛋白質的表面）
4.FC
流式細胞中分為兩種，一種是活細胞的流式，這種流失最好采用是天然蛋白或者重組蛋白的抗體來做，另外一種是經過固定之后的流式，和IF/IHC 所用抗體一致。 在做流式細胞中，我們有直接標記和間接標記，間接標記不如直接標記真實準確。因此我們選擇流式抗體要采用帶有熒光標記的抗體；如果研究的蛋白沒有直接標記的抗體，那么就采用間接標記抗體，需要添加熒光二抗。