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真菌毒素ELISA試劑盒操作處理方法
閱讀：309 發布時間：2020-1-8收獲糧食和庫存糧食的真菌毒素的檢測,往往批量大,時間緊,實驗室一般用酶聯免疫(ELISA)試劑盒進行篩選,由于市供ELISA試劑盒品牌比較多,前處理方法和操作方法也不盡相同,不同的試劑盒存在著測定結果方面的偏差。
真菌毒素ELISA試劑盒進行測試,研究分析試劑盒測試結果的穩定性、精密度和準確度,來選擇試劑盒的應用；研究建立了新的ELISA檢測方法的樣品前處理*參數,驗證了ELISA方法用于谷物中AFB1分析的可行性,并用HPLC重點驗證了測試盒的靈敏度、線性關系、檢測重復性、加標回收率等指標；
結果表明,對ELISA測定結果影響zui顯著的是甲醇濃度,其次是提取溶液體積、提取時間以及提取溫度。建立了新的ELISA法測定玉米中AFB1的前處理條件參數為：60目細度,7倍的75%甲醇溶液升溫到30℃時,振蕩45min提取。用高效液相法重點驗證了酶免測試盒時,HPLC法測定AFB1標準曲線為在200μg/mL到0.2μg/mL濃度的稀釋過程*不產生偏差,線性相關系數為1.0000。在添加濃度為0.1～20ug/kg時,HPLC法加標回收率為68%-88%,ELISA法的加標回收率為60%-108%,用ELISA法測定時線性系數為0.9978,靈敏度為0.0497 ug/L, ELISA法測定玉米中AFB1與HPLC法測定時的回收率相當。
黃曲霉毒素主要是由黃曲霉菌和寄生曲霉菌等多種真菌產生的有毒代謝產物,廣泛存在于糧食谷物和加工食品中,在眾多霉菌毒素中,黃曲霉毒素B1(AFB1)毒性大,致癌力強,理化性質穩定,對人類健康的危害性極大。