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大鼠心肌干細胞

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參考價4350
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

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  • 廠商性質

    經銷商
  • 所在地

    上海市

規格
5×1054350元15 瓶 可售
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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數:455

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
貨號 A01X1543 主要用途 僅供科研實驗
組織來源 心臟組織 種屬來源 大鼠
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詳細介紹

大鼠心肌干細胞

一、細胞基本屬性

細胞名稱

大鼠心肌干細胞

商品貨號

A01X1543

組織來源

心臟組織

種屬來源

大鼠

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

生長特性

貼壁生長

換液頻率

2-3天換液一次

細胞形態

梭形細胞

 

培養基:原代心肌干細胞培養體系

傳代特性:根據細胞特性傳代

消化液:0.25%胰dan白酶

培養條件:氣相:空氣 ,95%;  CO2 ,  5%

細胞簡介:心臟作為終末分化器官 ,然而近年來研究證實了心臟包含了可以再生的細胞 ,即 心肌干細胞。干細胞移植作為一種治療心臟疾病的新方法收到了廣泛的關注。此

,來源于同一器官的干細胞可避免異體干細胞移植導致的免疫排斥等風險。

心肌干細胞主要分化為心肌細胞 ,也可分化為血管內皮細胞與平滑肌細胞。
原代細胞分離培養的思路:

取材--分離--培養--鑒定

首先將組織從機體中取出,經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,再在合適的培養基中培養,使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定。

6.jpg

實驗步驟:

一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中,去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。

四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質。

五、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻,鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM培養液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中,置于37℃、5%CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含素的混合培養基,隨后隔天換液。

2.png
注意事項:

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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