詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AS 602801 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
AS602801是一種ATP競爭性的JNK抑制劑,作用于JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為80nM,90nM和230nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:848344-36-5 別名:Bentamapimod;AS602801;AS-602801 分子量:457.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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長鏈脂肪轉運蛋白4抗體類白喉棒桿菌烏克曼枸櫞桿菌
JNK抑制劑(AS 602801)N,N′-羰基二咪唑
其他 1,1’-羰基二咪唑;羰基咪唑;1,1ˊ-羰酰二咪唑;羰基二咪唑;1,1'-羰二咪唑
英文名稱: CDI
其他英文名稱: 1,1'-Carbonyldiimidazole;1,1'-Carbonylbis-1H-imidazole;N,N'-Carbonyldiimidazole
產品規格: 高純,98%
包 裝: 25克/100克/500克/1公斤
CAS號:530-62-1
C7H6N4O=162.15
級別:High purity grade
含量:≥98.0%
熔點:116~120℃
性狀:結晶性粉末,接觸空氣易變質,遇水在幾分鐘內即水解,并釋放出CO2
用途:生化研究。多肽試劑,用于生化合成基團保護及蛋白質肽鏈的連接。作為合成三磷核苷、肽、和酯類的縮合劑;以及是合成酰基咪唑和吡藜酰胺的重要中間體
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