操作規程：

1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

中文名稱：HDAC I型抑制劑(BG45)

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養基，并用新鮮培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。

黃暗青霉Bacillus pumilus

季也蒙畢赤酵母Rahnella aquatica

叢毛單胞菌Pseudomonas aeruginosa

黃曲霉Achromobacter xylosoxidans

白色短波單胞菌Citrobacter amalonaticus

粉紅單端孢霉Pseudomonas aeruginosa

大腸埃希氏菌Bacillus circulans

球毛殼Paenibacillus phyllosphaerae

傷口埃希菌Citrobacter amalonaticus

莖生擬莖點霉Stenotrophomonas maltophilia

淺紫灰鏈霉菌產色變種Lactococcus plantarum

許旺酵母屬Lactococcus lactis subsp. cremoris

枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

丁香直絲鏈霉菌Enterococcus mundtii

和緩艾美爾球蟲(LZ株)Streptococcus thermophilus

熒光假單胞菌Lactobacillus plantarum

海芽孢桿菌Bacillus│aquimaris 質量規格：>98%,標準品

肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumonia 質量規格：>98%,BR

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>95%
HDAC I型抑制劑(BG45)L-半胱鹽鹽無水物

其他L-2-基-3-巰基鹽鹽；L-氫氯半胱無水物

英文名稱：L-Cysteine Hydrochloride Anhydrous

產品規格：BR,99%

包裝：25克/100克/500克

CAS號：52-89-1

C3H7NO2S•HCl = 157.62

含量：≥99.0%

比旋光度：5.6～8.9°

PH：1.5～2.0

重金屬：≤10ppm

砷鹽：≤1ppm

鐵鹽：≤10ppm

干燥失重：≤1.0%

性狀：結晶或結晶性粉末,強味，無臭，僅有痕量亞硫鹽氣味。它在動植物體內是各組織細胞用來防御有害物質和增加活力的一種基，也是組成蛋白質的20多種基之一，并且是具有活性巰基(-SH)的基

用途：生化研究。NMDA 谷能受體激動劑，在高濃度時，也是AMPA谷能受體激動劑

保存：RT，避光