化工儀器網
詳細介紹
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MLN0905 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
商品介紹：
MLN0905是PLK1抑制劑，IC50為2nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1228960-69-7 別名：PLK1 Inhibitor 純度：96.77% 分子量：486.56 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
冷域黃桿菌Azospirillum melinis
肉桂鏈霉菌Halorubrum arcis
毛頭鬼傘Haloferax larsenii
貝倫格勒座腔菌梨專化型Haloferax larsenii
球黑孢菌Haloferax larsenii
斜臥青霉Halorubrum sp.
糞產堿菌糞亞種Paracoccus sulfuroxidans
克魯維酵母Paracoccus halophilus
亮白曲霉Baevibacterium sp.
普通變形桿菌Arthrobacter sp.
煙草色曲霉Micrococcus flavus
黑曲霉Comamonas sp.
奇異硬皮馬勃Arthrobacter sp.
矢野口鞘菌Kocuria sp.
孟氏假單胞菌Salinibacterium xinjiangense
山茶盤孢Flavobacterium glaciei
產棒桿菌Corynebacterium│ammoniagenes 質量規格：含量測定
綠產色鏈霉菌Streptomyces│viridochromogenes 質量規格：含量測定
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumannii 質量規格：含量測定
PLK1抑制劑(MLN0905)L-甘露糖
其他L(-)-甘露糖
英文名稱：L-Mannose
其他英文名稱：L-(?)-Mannose
產品規格：AR，99%
包裝：1克/5克/25克
CAS號：10030-80-5
C6H12O6=180.16
級別：AR
含量：≥99%
比旋光度：-13～-15o(C=4, H2O)
性狀：粉末。溶于水，熔點129～131℃
用途：生化研究。
化工儀器網