詳細(xì)介紹
大鼠原代睫狀肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代睫狀肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代睫狀肌細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代睫狀肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代睫狀肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇大鼠原代睫狀肌細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代睫狀肌細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果大鼠原代睫狀肌細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代睫狀肌細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若大鼠原代睫狀肌細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待大鼠原代睫狀肌細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
免疫球蛋白超家族成員5抗體 | 核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4) |
細(xì)胞粘附分子相關(guān)蛋白/癌基因下調(diào)蛋白抗體 | N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白抗體 |
C-肽抗體 | NCI-H1975細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞 CM-R047大鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
載脂蛋白A1抗體 | 水蛭素抗體 |
糖蛋白C抗體 | 趨化素樣因子超家族成員1抗體 |
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) | TGM2 Others Human 人 TGM2 / ansglutaminase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
p53結(jié)合蛋白1抗體 | 786-0細(xì)胞,腎透明細(xì)胞腺癌 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-D細(xì)胞 EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 | FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
酸化絲/蘇蛋白激酶II β/casein kinase IIβ抗體 | CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
鈣整合素結(jié)合蛋白1抗體 | IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
7號染色體開放閱讀框62抗體 | IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1 | 大鼠原代睫狀肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基HCAEC Pellet 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長添加物OKGS |
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人雪旺細(xì)胞RNAHSC miRNA5 μg |
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CL-0268COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
1.使用大鼠原代睫狀肌細(xì)胞時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代睫狀肌細(xì)胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代睫狀肌細(xì)胞正常使用。