實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：?

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
 大鼠雪旺氏細胞*培養小鼠畸胎瘤細胞

芬那（標準品） 質量含量測定 Mefenamic acid

 宇佐曲 Aspergillus usamii人肺成纖維細胞*培養

化鉀（標準品） 質量含量測定 Potassium iodide

  人肝細胞豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna

青蒿琥酯（標準品） 質量HPLC≥99%,含量測定 Artesunate

 香菇 Lentinula edodes嗜桿 Lactobacillus acidophilus

硫呤（標準品） 質量含量測定 Azathioprine

 植物桿 Lactobacillus plantarumTF-1(人血液白血病細胞)

青蒿琥酯 質量HPLC≥98%,BR Artesunate

 熱帶假絲酵母 Candida tropicalis宇佐曲 Aspergillus usamii

舒必利（標準品） 質量UV法含量測定 Sulpiride

 褐球固中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii

丁（標準品） 質量含量測定 Salbutamol

 大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicumIshikawa(人子宮內膜細胞)

水楊鎂（標準品） 質量含量測定 Magnesium salicylatePhospho-PLC gamma 2 (Tyr759)英文名稱：Marek's Disease Vaccine, Live6號染色體開放閱讀框132體

PLCG 1英文名稱：MDR1化鈣調酶B亞B1體

Phospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857)英文名稱：Metronidazole羊甾14α-去化酶蛋白體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)英文名稱：MAGE-A4補體C5體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)英文名稱：CAB395號染色體開放閱讀框24體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740)英文名稱：MAVS5號染色體開放閱讀框42體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)英文名稱：MCSF Receptor5號染色體開放閱讀框49體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)英文名稱：MTA15號染色體開放閱讀框35體
人GAPDH基因PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。