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雜交瘤細胞株;K3L25培養

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更新時間:2018-05-04 16:46:53瀏覽次數:590

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產品簡介

雜交瘤細胞株;K3L25培養只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  雜交瘤細胞株;K3L25培養
形態特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。

培養條件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權限 未定
雜交瘤細胞株;K3L25培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-Mafa/FITC 熒光素標記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體()IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Anti-Tbx21/T-bet/FITC 熒光素標記T細胞介導的轉錄調節因子Tbx21抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADAMTS8 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體 規格 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗雞IgM 0.3ml

GPR124 英文名稱: G蛋白偶聯受體124抗體(血管內皮標記物) 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgG 規格 0.1ml

Anti-Tbx21/T-bet/FITC 熒光素標記T細胞介導的轉錄調節因子Tbx21抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
MHC III /AgB III /H-1 III ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-AATF/FITC 熒光素標記拮抗凋亡轉錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Flotillin 1 脂閥結構蛋白1抗體 規格 0.2ml

omentin ELISA Kit 大鼠網膜素 96T

Phospho-mTOR (Ser2481) 英文名稱: 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 0.1ml

F-Actin 英文名稱: 纖維狀肌動蛋白抗體 0.1ml

Anti-AATF/FITC 熒光素標記拮抗凋亡轉錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

RBP ELISA Kit 大鼠視黃醇結合蛋白 96T

MMP-1 英文名稱: 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh FAM101A FAM101A蛋白抗體 規格 0.2ml

Resistin ELISA Kit 大鼠抵抗素Multi-class antibodies規格: 48T

AIPL1 英文名稱: 遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體 0.1ml

Anti-ASPP2/FITC 熒光素標記P53凋亡刺激蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
IL-19 小鼠白介素-19Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-ERK1/2(p44/42 MAPK) 原活化蛋白激酶1/2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MTGR1 髓易位基因相關蛋白1抗體 規格 0.2ml

CyPB(Human cyclophilin B) ELISA Kit 人嗜環蛋白/親環素B 96T

Smoothelin 英文名稱: 平滑肌蛋白抗體 0.1ml

CD45 英文名稱: 白細胞共同抗原抗體 0.1ml

Anti-ERK1/2(p44/42 MAPK) 原活化蛋白激酶1/2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

 

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