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志賀氏菌PCR檢測試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-23 13:17:52瀏覽次數(shù):333

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 產(chǎn)品僅用于科研
儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融 分類 PCR檢測試劑盒
志賀氏菌PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)PCR檢測試劑盒 ,英文名: PROCR
兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 50T
犬N端前腦素(-proBNP)免疫試劑盒 Canine N-terminal pro-brain naiuretic peptide,-p

詳細(xì)介紹

使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,43,2
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對照。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

志賀氏菌PCR檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

5.png

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20
,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針法

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針法即除了引物外另外設(shè)置一個(gè)探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),這個(gè)時(shí)候,兩個(gè)平衡不發(fā)光,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時(shí)候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),兩個(gè)距離較遠(yuǎn),發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機(jī)器收集到信號(hào),從而檢測基因的量

染料能夠與雙鏈結(jié)合,當(dāng)PCR擴(kuò)增的時(shí)候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個(gè)的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號(hào),我們可以看出,染料法特異性不強(qiáng),只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。

在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時(shí)間來完成更快的擴(kuò)增,且不會(huì)影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個(gè)結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時(shí)間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時(shí)間的1/21/3,卻能維持較高的擴(kuò)增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時(shí)間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時(shí)檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時(shí)檢測或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時(shí)加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時(shí)檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(PV2)PCR檢測試劑盒 ,英文名: PV2

犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 50T

犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒 Canine cardiac isoform of opnin T,c

英文名稱HumanmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit人組織相容性復(fù)合物(MHC)

免疫化學(xué)封閉溶液10毫升

Rat
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒 ,英文名: ucOC ELISA Kit

小鼠基質(zhì)金屬2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAkit 96T/48T

人轉(zhuǎn)移酶6抗體(IgM)免疫試劑盒 Human ansglaminase 6 aibody IgM ELISA kit

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

APC蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

Mousehemeoxygenase1,HO-1ELISA試劑盒小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) /FITC
熒光素標(biāo)記0酸化p21激活1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg

G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體 Anti-G Protein 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Bio 標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

phospho-FLNC (2233) 英文名稱: 0酸化細(xì)絲蛋白2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SRF (Ser77) 0酸化生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子) 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
志賀氏菌PCR檢測試劑盒大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 ,英文名: BAX ELISA Kit

Mouse bone morphogenetic protein 7 (BMP-7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒

Mouseosteonectin,ONELISAKit 小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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通用型煙草花葉病毒(TobaccoMosaicVirus;TMV)基因定量檢測試劑盒20

ELISAKitHSF1大鼠熱休克因子1規(guī)格:48T/96T


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