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登革病毒型PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-16 08:55:22瀏覽次數:177

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50T
應用領域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱? Dengue?Virus(DENV)4RTPCR 儲存條件? -20℃避光保存,避免反復凍融
分類? PCR檢測試劑盒    
登革病毒型PCR檢測試劑盒公司正在出售的產品:水稻內源基因SPS 核酸檢測試劑盒
水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測試劑盒
水貂腸炎病毒PCR檢測試劑盒
水痘帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

英文名稱

規格

登革病毒型PCR檢測試劑盒

Dengue Virus(DENV)4RTPCR

50T

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法

1.

血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.

血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。

3.

細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4.

組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。

5.

保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。






5.png

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針法

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針法即除了引物外另外設置一個探針,在探針的兩端分別帶上發光集團和淬滅集團,這個時候,兩個平衡不發光,但是當DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,發光集團產生熒光,被機器收集到信號,從而檢測基因的量

染料能夠與雙鏈結合,當PCR擴增的時候,染料結合到DNA上,從而發光,單個的染料不發光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結合發光。

在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產量和效率。快速循環條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,卻能維持較高的擴增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


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PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度

IgM/Cy5.5 Cy5.5

標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml


Filaggrin: 兜甲蛋白抗體 0.1ml

白細胞粘附蛋白抗體 Anti-CD18/LFA-1 0.2ml

Anti-NR2C/NMDAR2C /FITC 熒光素標記谷受體2C抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLSCR3 0脂爬行酶3抗體 規格 0.2ml

Anti-CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
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登革病毒型PCR檢測試劑盒HPV18 E6 人類狀瘤病毒18抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 0酸化細胞周期檢測點2抗體 規格 0.1ml

兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 國產

WNT7A 英文名稱: 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml

Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名稱: 0酸化D酪酸衰減蛋白2抗體 0.1ml

Anti-ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。

1.

標記 6 個離心管,分別為 765432

2.

用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

3.

7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4.

換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5.

換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6.

重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備

7.

用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

8.

如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)

9.

如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。












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