馬結(jié)合珠蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA）用于測(cè)定馬血清、血漿和尿液中的觸珠蛋白（HPT）。用于研究只有。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO銷(xiāo)售產(chǎn)品連接珠蛋白(馬)ELISA試劑盒，96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

連接珠蛋白(馬)ELISA試劑盒，96孔檢測(cè)原理：

如圖1所示，在這種測(cè)定中，樣品中的 HPT 與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗HPT抗體發(fā)生反應(yīng)。通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗HPT抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的HPT形成復(fù)合物。經(jīng)過(guò)另一次洗滌步驟后，通過(guò)添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來(lái)測(cè)定結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測(cè)試樣品中HPT的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測(cè)試樣品中HPT濃度的量度。測(cè)試樣品中HPT的量可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進(jìn)行校正。

所需材料但未提供

精密移液器（2微升至1000微升），用于制備和分配稀釋液

試管

噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀取器

用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

計(jì)時(shí)器

離心機(jī)

抗凝劑（用于血漿樣品收集）

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)。

處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝塊、明顯溶血、脂血，或如果樣品的完整性存在問(wèn)題，請(qǐng)做好記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

下列樣品收集和儲(chǔ)存條件僅供參考。

未評(píng)估樣品的穩(wěn)定性。

血清樣品：應(yīng)通過(guò)靜脈采血。血凝塊形成后，通過(guò)離心分離血清。移除血清并立即進(jìn)行測(cè)定，或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣品：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

尿液樣品：使用無(wú)菌或干凈的尿液收集器收集中段尿。離心以去除細(xì)胞碎片。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

樣品稀釋

測(cè)定要求每個(gè)測(cè)試樣品在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行測(cè)定時(shí)，所有樣品都應(yīng)進(jìn)行雙重測(cè)定。推薦的稀釋比例僅供參考。

稀釋比例應(yīng)基于未知樣品的預(yù)期濃度，以使稀釋后的樣品落在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品值，在運(yùn)行整個(gè)板之前，強(qiáng)烈建議對(duì)一個(gè)或兩個(gè)代表性樣品進(jìn)行系列稀釋。

血清和血漿樣品：建議的起始稀釋比例為1:10,000。要制備1:10,000的樣品稀釋液，將5微升的樣品轉(zhuǎn)移到495微升的1X稀釋液中。這會(huì)產(chǎn)生1:100的稀釋液。 接下來(lái)，將1:100的樣品再稀釋?zhuān)瑢?微升轉(zhuǎn)移到495微升的1X稀釋液中。這會(huì)產(chǎn)生1:10,000的稀釋液。每個(gè)階段都要c底混合

ALPCO產(chǎn)品種類(lèi)多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

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