IgG是一種在免疫系統中發揮關鍵作用的抗體。IgG抗體由漿細胞產生,是血液和組織中含量豐富的抗體類型。它們參與識別和中和細菌、病毒等病原體,同時還激活免疫系統的其他成分。
ICL的小鼠IgG ELISA試劑盒能夠準確地快速定量您生物樣本中的總IgG。
艾美捷小鼠IgG ELISA試劑盒(#E-90G):
抗體類型:ELISA
宿主:山羊
目標物種:小鼠
特異性/目標:IgG重鏈+輕鏈(h+l)
規格:1.0
檢測范圍:9.375 ng/ml 600 ng/ml
靈敏度:2.084 ng/ml
檢測時間:100分鐘
樣本類型:血漿、血清
儲存條件:2-8°C
所需材料(但未提供):
精密移液管(2 uL至100 uL),用于制備和分裝稀釋液
試管
噴霧瓶或微量滴定板洗滌/抽吸裝置
蒸餾水或去離子水
微量滴定板讀取器
用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿
用于樣本收集的離心機
用于血漿收集的抗凝劑
計時器
樣本采集與處理:
所有血液成分和生物材料都應被視為潛在危險品。在處理和丟棄時應遵循普遍預防措施。
如果血液樣本凝固、嚴重溶血、乳糜血或樣本完整性受到質疑,請做好記錄,并謹慎解讀結果。
以下樣本采集和儲存條件僅供參考。樣本穩定性尚未經過評估。
血清樣本:通過靜脈穿刺采集血液。血凝塊形成后,通過離心將血清與細胞分離。立即進行檢測,或分裝后將樣本儲存于–80°C(優先)或–20°C。避免反復凍融。
血漿樣本:將血液采集到含有抗凝劑的容器中,然后離心。立即進行檢測,或分裝后將樣本儲存于–80°C(優先)或–20°C。避免反復凍融。
尿液樣本:使用無菌或干凈的尿液收集器采集中段尿。離心去除細胞碎片。立即進行檢測,或分裝后將樣本儲存于–80°C(優先)或–20°C。避免反復凍融。
已知干擾物:濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。
樣本稀釋:
檢測要求每個測試樣本在使用前必須進行稀釋。每次進行檢測時,所有樣本都應進行雙份檢測。推薦的稀釋倍數僅供參考。稀釋倍數應根據未知樣本的預期濃度來確定,使稀釋后的樣本落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣本水平,在運行整個板之前,建議先用一兩個代表性樣本進行系列稀釋。
血清樣本:推薦起始稀釋倍數為1/50,000。要制備1/50,000稀釋液,將5 uL樣本轉移到995 uL 1X稀釋液中。得到1/200稀釋液。接下來,將4 uL 1/200稀釋液轉移到996 uL 1X稀釋液中。得到1/50,000稀釋液。每個階段充分混合。
血漿樣本:推薦起始稀釋倍數為1/50,000。要制備1/50,000稀釋液,將5 uL樣本轉移到995 uL 1X稀釋液中。得到1/200稀釋液。接下來,將4 uL 1/200稀釋液轉移到996 uL 1X稀釋液中。得到1/50,000稀釋液。每個階段充分混合。
檢測原理:
在此檢測中,樣本中存在的IgG與吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgG抗體發生反應。經過洗滌去除未結合的蛋白質后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗IgG抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的IgG形成復合物。經過另一次洗滌步驟后,通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)來檢測與免疫吸附劑結合的酶。結合的酶量與樣本中IgG的濃度成正比;因此,450 nm處的吸光度是測試樣本中IgG濃度的衡量指標。可以通過從標準曲線(由標準品構建)中插值得到測試樣本中IgG的量,并根據樣本稀釋情況進行校正。
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