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S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化:植物生長的關鍵標志物

時間:2025/1/20閱讀:139
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核糖體S6激酶1/2S6K1/2)參與TOR信號通路,參與滲透脅迫反應。被PDK1激活,在滲透脅迫下被抑制。在所有組織中表達,特別是在生長芽、根尖、葉緣和發芽種子的高代謝活動期間。替代名稱:AtPK1/AtPK6 S6K1)、AtPK2/AtPK19S6K2)。

 

艾美捷S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化

貨號:AS13-2664

免疫原:與KLH偶聯的肽段,含有磷酸化蘇氨酸(phospho-Thr),來源于擬南芥S6K1UniProt: P42818TAIR: AT3G08730)和S6K2UniProt: Q39030TAIR: AT3G08720)。由于高度氨基酸同源性,所選肽段在這兩種蛋白(S6K1S6K2)中均保守。

宿主:兔子

克隆性:多克隆

純度:免疫原親和純化的血清,溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(PBS)中。

形式:凍干

數量:50 µg

復溶:復溶時加入50 µl無菌水。

儲存:凍干品/復溶后儲存于-20°C;復溶后請分裝保存,避免反復凍融。打開前請短暫離心管子,以避免因物質粘附在管蓋或管壁上而導致的損失。切勿在4°C下儲存該抗體。

測試應用:西方印跡(WB

推薦稀釋度:1:500WB

預期 表觀分子量:S6K152.6 kDaS6K253 kDa | 60 kDa

確認的反應性:擬南芥

預測的反應性:甘藍、鹽芥

未反應的:目前尚未發現與預測反應性不符的已知例外。

 

應用舉例:

71.png

10天齡的擬南芥幼苗中提取30 µg總蛋白,提取緩沖液為Lacus緩沖液,有或無磷酸酶抑制劑,并在變性前于4°C保存。樣品在95°C下變性5分鐘,隨后在6.5% SDS-PAGE上分離,并轉印至PVDF膜,轉印時間為2小時。磷酸酶處理使用CIAP(“+"表示添加磷酸酶抑制劑,“-"表示未添加磷酸酶抑制劑)。膜在室溫下用5%脫脂奶粉(TBST)封閉1小時,期間不斷攪拌。膜在4°C下用一抗(稀釋度1:500)孵育過夜,期間不斷攪拌。棄去抗體溶液后,膜用TBST洗滌三次,每次15分鐘,期間不斷攪拌。膜在室溫下用二抗(山羊抗兔IgG,辣根過氧化物酶偶聯,AgriseraAS09 602)孵育1小時,稀釋度為1:10,000,期間不斷攪拌。膜用上述方法洗滌后,用ECL顯色5分鐘,按照制造商的說明操作。曝光時間為幾分鐘。

感謝西班牙CRAGRossana Henriques博士提供支持。

其他信息(應用):

蛋白質提取后,提取物必須立即進行SDS-PAGE電泳,不得冷凍。

 

S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化文獻參考:

Tanigawa et al. (2024). FYVE1/FREE1 is involved in glutamine-responsive TORC1 activation in plants. iScience. 2024 Aug 26;27(9):110814. doi: 10.1016/j.isci.2024.110814.  

Li et al. (2023). Mitigating growth-stress tradeoffs via elevated TOR signaling in rice. Mol Plant. 2023 Dec 5:S1674-2052(23)00396-9. doi: 10.1016/j.molp.2023.12.002.

Primo et al (2022). Plasma membrane H+-ATPases promote TORC1 activation in plant suspension cells. iScience. 2022 Apr 11;25(5):104238. doi: 10.1016/j.isci.2022.104238. PMID: 35494253; PMCID: PMC9046228.

Wang et al. (2022), FERONIA functions through Target of Rapamycin (TOR) to negatively regulate autophagy, Front. Plant Sci., 23 August 2022, Sec. Plant Cell Biology, Volume 13 - 2022,


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