發(fā)表于NATURE的《Plasmacytoid Dendritic Cells Control Homeostasis of Megakaryopoiesis》研究中，通過研究血漿樣樹突狀細(xì)胞（Plasmacytoid Dendritic Cells, pDCs）在巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中的作用，揭示了一個新的調(diào)控機制。pDCs作為先天性免疫細(xì)胞，主要功能是檢測病毒感染，但本文發(fā)現(xiàn)它們還在巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中扮演著重要角色。

實驗設(shè)計與方法：

實驗動物模型：實驗采用了多種轉(zhuǎn)基因小鼠模型，包括Vwf-eGFP報告小鼠、PF4-cre;iDTR小鼠、Ifnar?/?小鼠等，用于追蹤巨核細(xì)胞譜系、誘導(dǎo)巨核細(xì)胞死亡以及研究IFNα受體在巨核細(xì)胞中的作用。此外，還使用了人類ACE2轉(zhuǎn)基因小鼠（FVB-K18-hACE2）來研究SARS-CoV-2感染對巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的影響。

體內(nèi)成像技術(shù)：文章采用了雙光子活體顯微鏡（Two-Photon Intravital Microscopy, 2P-IVM）技術(shù)，對小鼠顱骨骨髓進(jìn)行長時間成像，以實時追蹤巨核細(xì)胞及其祖細(xì)胞的空間分布和動態(tài)變化。該技術(shù)使得研究者能夠觀察巨核細(xì)胞在骨髓中的生長、移動和血小板釋放過程。

流式細(xì)胞術(shù)與分子生物學(xué)技術(shù)：流式細(xì)胞術(shù)用于分析骨髓中各種細(xì)胞類型的數(shù)量、比例和激活狀態(tài)。分子生物學(xué)技術(shù)如RNA測序（RNA-seq）和單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）則用于深入分析巨核細(xì)胞祖細(xì)胞在血小板需求增加時的轉(zhuǎn)錄組變化。

ELISA檢測：特別值得一提的是，文章中使用了艾美捷/PBL Assay Scienc Mouse IFN Alpha All Subtype ELISA Kit，小鼠IFN-Alpha全型ELISA檢測試劑盒（貨號：PBL-42115-1）來檢測骨髓細(xì)胞培養(yǎng)上清液及小鼠體內(nèi)的IFNα水平。該ELISA試劑盒具有高靈敏度，能夠精確測量小鼠IFNα的含量，為揭示pDCs在巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中的作用提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。

實驗結(jié)果：

pDCs作為巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的傳感器：實驗發(fā)現(xiàn)，pDCs在骨髓中巡邏，通過檢測凋亡巨核細(xì)胞釋放的細(xì)胞游離DNA，激活TLR9-MYD88-IRF7通路，釋放IFNα。IFNα進(jìn)而觸發(fā)巨核細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖和成熟，以維持巨核細(xì)胞和血小板的穩(wěn)態(tài)。

pDCs在應(yīng)激狀態(tài)下的作用：在血小板消耗模型中，pDCs顯著增加了與巨核細(xì)胞的接觸，并通過釋放IFNα迅速促進(jìn)巨核細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖，確保血小板的快速恢復(fù)。這表明pDCs在應(yīng)激狀態(tài)下對巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的維持至關(guān)重要。

IFNα對巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的調(diào)控：通過體外實驗和體內(nèi)注射IFNα，研究證實了IFNα在促進(jìn)巨核細(xì)胞增殖和成熟中的關(guān)鍵作用。同時，IFNα受體（IFNAR）敲除小鼠表現(xiàn)出巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)受損，進(jìn)一步證明了IFNα信號在pDC調(diào)控巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中的必要性。

PBL Assay Science-Mouse IFN Alpha All Subtype ELISA Kit的作用和價值

高靈敏度與準(zhǔn)確性：該試劑盒具有高靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確檢測小鼠體內(nèi)及體外實驗中IFNα的微小變化。這對于揭示IFNα在巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)調(diào)控中的關(guān)鍵作用至關(guān)重要。

實驗結(jié)果的可重復(fù)性：該ELISA試劑盒提供了標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，確保了實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。這為不同實驗室之間的數(shù)據(jù)比較和交流提供了便利。

廣泛的應(yīng)用范圍：除了本文研究的巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)外，該ELISA試劑盒還可用于其他涉及IFNα的研究領(lǐng)域，如自身免疫性疾病、病毒感染、腫瘤免疫等。它將成為這些領(lǐng)域研究IFNα功能的重要工具。

總結(jié)：

本文揭示了pDCs作為巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的重要調(diào)控因子，通過檢測凋亡巨核細(xì)胞釋放的細(xì)胞游離DNA并釋放IFNα來維持巨核細(xì)胞和血小板的穩(wěn)態(tài)。這一發(fā)現(xiàn)不僅加深了我們對巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)調(diào)控機制的理解，也為相關(guān)疾病的治療提供了新的靶點和思路。

未來研究可以進(jìn)一步探討pDCs在其他生理和病理狀態(tài)下的作用機制，以及IFNα信號通路在巨核細(xì)胞穩(wěn)態(tài)調(diào)控中的具體分子機制。同時，利用PBL Assay Science的ELISA試劑盒與IFN產(chǎn)品有助于這些研究的深入進(jìn)行。

Gaertner, F. et al., (2024), "Plasmacytoid dendritic cells control homeostasis of megakaryopoiesis", Nature, PMID: 38987596, DOI: 10.1038/s41586-024-07671-y