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FabGennix-PDEase套件,在2-3小時內提供可重復的結果

時間:2024/10/11閱讀:133
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cAMP是一種普遍存在于所有哺乳動物細胞中的第二信使。這種信使調節各種激素、神經遞質、生長因子、細胞因子和其他配體受體的信號轉導。cAMP磷酸二酯酶是水解和截斷源自受體激活的cAMP信號傳導的唯1途徑。cAMP水解活性由一個相當大的多酶家族提供,該家族具有D特的細胞內定位和調節特性。在各種PDE家族(PDE1-PDE11)中,PDE44個基因(PDE4APDE4BPDE4CPDE4D)以多剪接變體形式表達。

 

PDE4活性測量需要兩步反應,在第一步反應中,cAMPPDE活性水解成非環狀。通過使PDE源變性或加入PDE4選擇性抑制劑來停止該反應,然后通過第二步酶反應將AMP轉化為腺苷達到平衡。由于腺苷是中性的,因此通過離子交換色譜法用電荷分離cAMPAMP。為了避免其他PDE的背景貢獻,該PDE測定在針對PDE4優化的底物濃度下進行。PDE4酶活性與第一反應中形成的腺苷成正比。

 

PDE4活性測量在2-3小時內提供可重復的結果。該試劑盒提供足夠的試劑,與內部控制一起處理50100個樣本。試劑盒試劑在推薦條件下儲存可穩定6個月。該試劑盒的內容物必須按照瓶子標簽和規格表上的指示在不同溫度下儲存。

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艾美捷FabGennix-PDEase套件PDEase-100)組成成分:

孵育緩沖液試劑A5毫升

孵育緩沖液試劑B5毫升

孵育緩沖液試劑C5毫升

PDE底物緩沖液D10毫升

PDE底物:2200微升

抑制劑緩沖液:50毫升

第二酶源(10倍濃縮液): 2250微升

樹脂懸浮液(10倍濃縮液):100毫升

PDE4酶對照:1200微升

 

文獻參考:

Joshi, Rashika, et al. "Phosphodiesterase (PDE) inhibitor torbafylline (HWA 448) attenuates burn-induced rat skeletal muscle proteolysis through the PDE4/cAMP/EPAC/PI3K/Akt pathway." Molecular and cellular endocrinology 393.1 (2014): 152-163. PMID24973766

Al-Tawashi, Azza, and Chris Gehring. “Phosphodiesterase Activity Is Regulated by CC2D1A That Is Implicated in Non-Syndromic Intellectual Disability." Cell Communication and Signaling?: CCS 11 (2013): 47. PMC3704924

Gobejishvili, Leila et al. “Rolipram Attenuates Bile Duct Ligation–Induced Liver Injury in Rats: A Potential Pathogenic Role of PDE4." The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 347.1 (2013): 80–90. PMC. PMC3781411

Gobejishvili, Leila et al. “S-Adenosylmethionine Decreases Lipopolysaccharide-Induced Phosphodiesterase 4B2 and Attenuates Tumor Necrosis Factor Expression via cAMP/Protein Kinase A Pathway." The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 337.2 (2011): 433–443.  PMC3083110

Li, Yuting et al. “Regulation of Amygdalar PKA by β-Arrestin-2/phosphodiesterase-4 Complex Is Critical for Fear Conditioning."Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 106.51 (2009): 21918–21923. PMC2799795

 

艾美捷科技是FabGennix的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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