PARP1,也稱為聚ADP核糖聚合酶1或NAD+ADP核糖基轉移酶1,是PARP家族的一部分,是z豐富的成員。ADP核糖基化是將ADP核糖添加到蛋白質中,是主要參與DNA損傷反應(DDR)途徑的蛋白質的一種多樣的翻譯后修飾。聚ADP核糖基化(稱為PARylation)是ADP核糖直鏈或支鏈的加成。PARP1通過非同源末端連接(NHEJ)、同源重組(HR)、微同源介導的末端連接(MMEJ)和核苷酸切除修復參與DNA修復。DDR通路的功能障礙可導致腫瘤發生。PARP1在乳腺癌和結腸癌癌癥、神經母細胞瘤和其他疾病中的過度表達已被發現。這種過度表達可導致MMEJ增加,這是一種錯誤的DNA修復機制,以及導致癌癥的基因組不穩定性。除了參與DDR外,PARP1還與炎癥和I型糖尿病有關。PARP1抑制劑已成功應用于癌癥治療。除了減少MMEJ外,當同源重組修復(HRR)機制已經存在缺陷時,PARP1抑制劑還可以導致合成致死性,如BRCA1(乳腺癌癥易感蛋白1型)和BRCA2缺陷細胞。進一步了解涉及PARP1的分子途徑及其對疾病的貢獻,將繼續為PARP1相關疾病的新療法鋪平道路。
PARP1比色測定試劑盒旨在測量PARP1(聚ADP核糖聚合酶1)活性,用于篩選和分析應用程序。PARP1檢測試劑盒采用方便的96孔格式,具有足夠的純化的PARP1酶、反應底物和用于100個酶反應的PARP測定緩沖液。
圖1。PARP1比色分析試劑盒示意圖。組蛋白被涂覆在96孔板上。接下來,在優化的測定緩沖液中,將生物素化的NAD+混合物(稱為PARP底物混合物)與PARP1酶和活化的DNA模板一起插管。然后用鏈霉抗生物素-HRP處理平板,然后加入比色HRP底物,產生有色溶液。產生的信號與PARP1活動成正比
艾美捷PARP1比色測定試劑盒:
貨號:BPS-80580
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶1,聚(ADP-核糖基)轉移酶,ADPRT,PARP1,PARP-1
試劑盒格式:比色法
物種:人類
需要但未提供的物料:
1x PBS(磷酸鹽緩沖液)緩沖液
含0.05% Tween-20的PBST緩沖液(1x PBS)
能夠在λ=450納米處讀取吸光度的UV/Vis分光光度計微孔板閱讀器*
2摩爾硫酸(水溶液)
可調節的微量移液器和無菌吸頭
旋轉搖床
*或者,可以使用在650納米處讀取的分光光度計,但試劑盒的靈敏度將大大降低。
UniProt #P09874
儲存/穩定性:如果按照指示儲存物料,試劑盒在收到日期起6個月內將表現最佳。
應用:研究酶動力學,篩選小分子抑制劑,用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用。
運輸溫度:-80°C
科學類別:PARP
監管狀態:僅限研究使用
PARP1比色測定試劑盒文獻參考:
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
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