HiSense™ cDNA合成主混合液是一種全合一（All-in-one）格式的產品，它允許更方便、更快速地合成第一鏈cDNA。該主混合液含有M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆轉錄酶（RTase）、核糖核酸酶抑制劑、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）和Oligo（dT）引物。

Oligo (dT) 是能夠與 mRNA 的 3'-Poly(A) 尾部退火的寡核苷酸。Oligo (dT) 的用途僅限于具有 3'-Poly(A) 尾部的 mRNA 或總 RNA 模板。

一般說明：

1) 富集的聚腺苷酸 (poly(A)+) mRNA 和總 RNA 都可用于第一鏈 cDNA 的合成，但富集的聚腺苷酸 mRNA 可能會產生更高的產量和最終產品更好的純度。

2) RNA 樣本必須無基因組 DNA 污染。

3) 為了去除與 cDNA 互補的 RNA，加入 1 µl (2 U) 的大腸桿菌核糖核酸酶 H 并在 37°C 下孵育 20 分鐘。

4) 第一鏈 cDNA 合成完成后，cDNA 產物可以直接作為模板用于標準 PCR/qPCR。

艾美捷CellSafe HiSense cDNA合成主混合液#CDS-100, CDS-200, CDS-400, CDSM-200, CDSM-400, LCDS-96, LCDS-480操作步驟：

1) 在冰上解凍 RNA 模板和全合一 5X cDNA 主混合液。輕輕但che底地混合溶液。

2) 在冰上的 PCR 管中準備以下反應混合物。

3) 充分混合組分并通過簡短的離心收集。在以下反應條件下孵化混合物。

4) 新合成的第一鏈 cDNA 已準備好用于立即的下游應用，或在 -20°C 下長期儲存。

CellSafe HiSense cDNA合成主混合液 qPCR結果：

使用HiSense™QGreenBlue qPCR Master Mix（目錄號QBLR-05）擴增人cDNA的GAPDH基因（217bp片段）

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