膠原酶是一種能夠分解動物組織中的原生膠原蛋白的酶類。膠原酶包含一系列酶活性，包括膠原酶、酪蛋白酶、肉毒桿菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解膠原蛋白并分離組織。這些酶由多種微生物和許多不同的動物細胞制造。強效的膠原酶是厭氧細菌產生的肉毒桿菌組織溶解素。細菌膠原酶是一種含有膠原酶的粗制復合物，更準確地稱為肉毒桿菌肽酶A，這是一種對脯氨酸-甘氨酸鍵（Pro-X-Gly-Pro序列中的X）具有特異性的蛋白酶，其中X最常是中性氨基酸。這些序列在膠原蛋白中經常出現，但在其他蛋白質中很少見。盡管許多蛋白酶可以水解單鏈變性的膠原多肽，但肉毒桿菌肽酶A在蛋白酶中獨-特之處在于它能夠攻擊和降解結締組織中常見的三股螺旋原生膠原纖維。真正的膠原酶可以同時跨越所有三個鏈條進行切割，或者在單股上進行攻擊。哺乳動物膠原酶在特定位點將膠原在其原生三股螺旋構象下分裂，產生代表原膠原分子3/4和1/4長度的片段TC A和TC B。碎片化后，這些片段會展開成隨機多肽，并更容易受到其他蛋白酶的攻擊。

艾美捷膠原酶，凍干粉，50 毫克#ABM-5030-50MG應用領域：

膠原酶作為膠原凝膠的解離試劑提供。各種膠原酶產品已經專門評估用于與Advanced BioMatrix的膠原產品一起使用。該產品旨在提高從膠原凝膠中分離的細胞的存活能力和功能性。

膠原酶以50毫克包裝大小的凍干、無菌粉末形式提供。重新溶解后，產品即可使用。

膠原酶作為供應的產品不適用于人體使用

膠原酶，凍干粉特性：

來源：來自Clostridium histolyticum

形式：凍干粉末

酶活性：單位干重 > 125 U/mg，酪蛋白酶 > 200 U/mg，肉毒桿菌蛋白酶 < 4 U/mg，胰蛋白酶 < 0.5 U/mg

膠原酶單位定義：1單位在37°C、pH 7.5條件下，在5小時內從膠原中釋放出一個微摩爾的L-亮氨酸當量

包裝大小：50毫克

滅菌：0.22微米過濾

無菌性：無生長

存儲：建議將膠原酶凍干粉末存儲在2-10°C。重新溶解后，產品在2到10°C穩定，可保存長達5天。

膠原酶，凍干粉使用說明：

請按照以下建議作為指南，確定最佳的凝膠解離程序適用于您的培養系統。

1. 在磷酸鹽緩沖鹽水或其他pH中性介質中重新溶解凍干膠原酶粉末（50毫克）。可以使用典型濃度1毫克/毫升。

2. 吸除膠原凝膠中的培養基。

3. 用預熱的PBS或其他pH中性介質洗滌膠原凝膠2次，以去除可能抑制膠原降解的培養基。

4. 加入適量的膠原酶溶液（一個凝膠體積應該足夠）。例如：對于含有0.5毫升凝膠的24孔板，加入0.5毫升膠原酶溶液。

5. 轉移到37°C孵育箱中，孵育30-60分鐘。為了促進膠原凝膠更快地解離，可以使用大口徑移液吸頭上下吸移凝膠和膠原酶溶液。

6. 如有必要，再孵育30-60分鐘，以完成凝膠的消化。如果需要，每15分鐘移液攪拌凝膠/細胞混合物。注意：更厚的凝膠或含有更高細胞濃度的凝膠可能需要更多時間。

7. 一旦凝膠完-全消化，向凝膠/細胞混合物中加入等量的完整培養基，然后收集細胞。沖洗培養容器，收集任何殘留細胞。

8. 將細胞懸浮液在室溫下以250 x g離心5分鐘。

9. 小心吸除上清液，并將細胞沉淀懸浮在0.5-1毫升新鮮培養基中。

10. 使用血細胞計數板和嘗試藍染色液確定細胞計數和存活率。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。