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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>游離脂肪酸 (FFA) 含量檢測(cè)試劑盒樣品制備方案
游離脂肪酸(FFA),也被稱為非酯化脂肪酸,不僅是脂肪水解的產(chǎn)物,也是脂肪合成的底物,在血漿中與白蛋白結(jié)合循環(huán)。血清中的FFA濃度與脂質(zhì)代謝、碳水化合物代謝和內(nèi)分泌功能有關(guān)。由于糖尿病、嚴(yán)重肝功能障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病,FFA的濃度會(huì)增加。EZMeta™游離脂肪酸(FFA)比色測(cè)定試劑盒為血清、血漿、動(dòng)植物組織、細(xì)胞和細(xì)菌中FFA的檢測(cè)提供了方便的工具。其原理是FFA與銅離子結(jié)合形成可溶于氯仿的脂肪酸銅鹽。通過測(cè)定銅離子的含量,可以計(jì)算出游離脂肪酸的含量,采用銅試劑法進(jìn)行測(cè)定。
艾美捷 游離脂肪酸 (FFA) 含量檢測(cè)試劑盒:
編號(hào):D-AKC2230
規(guī)格:48T / 96T
存儲(chǔ):儲(chǔ)存在4°C下,避光,有效期為12個(gè)月
適用樣品:血清、血漿、動(dòng)植物組織、細(xì)胞和細(xì)菌。
游離脂肪酸 (FFA) 含量檢測(cè)試劑盒提供的材料和儲(chǔ)存條件:
所需材料(但不包括在內(nèi)):
· 可以測(cè)量550 nm吸光度的微孔板閱讀器或可見光分光光度計(jì)
· 培養(yǎng)箱、冰制機(jī)、冷藏離心機(jī)
· 96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液吸頭
· 均質(zhì)器(用于組織樣品)
· 玻璃瓶(用于制備提取緩沖液)
· N-庚烷、無水甲醇、氯仿
游離脂肪酸 (FFA) 含量檢測(cè)試劑盒試劑制備:
提取緩沖液:自行準(zhǔn)備。取一個(gè)玻璃瓶,按照氯仿:N-庚烷:無水甲醇=28:21:1的比例制備提取緩沖液。將混合物密封存儲(chǔ)在4°C,避光條件下。銅試劑:按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室溫。存儲(chǔ)在4°C,避光條件下。顯色劑:按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室溫。存儲(chǔ)在4°C,避光條件下。標(biāo)準(zhǔn)品:在使用前加入1 mL提取緩沖液溶解。濃度為64 mM。該溶液可以密封存儲(chǔ)在玻璃瓶中,4°C,避光條件下。標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)置:根據(jù)下表將64 mM標(biāo)準(zhǔn)品用提取緩沖液稀釋。
游離脂肪酸 (FFA) 含量檢測(cè)試劑盒樣品制備:
注意:建議使用新鮮樣品。如果不能立即進(jìn)行測(cè)定,樣品可以在-80°C下儲(chǔ)存6個(gè)月。1.動(dòng)物組織:稱取0.1 g組織,加入1 mL提取緩沖液,在冰上均質(zhì)。以4°C下8,000 rpm離心10分鐘。使用上清液進(jìn)行測(cè)定。2.植物組織:稱取0.1 g組織,加入1 mL提取緩沖液并研磨。在冰上超聲處理5分鐘(功率20%或200 W,超聲時(shí)間3秒,間隔時(shí)間7秒,重復(fù)30次)。以4°C下8,000 rpm離心10分鐘。使用上清液進(jìn)行測(cè)定。3.細(xì)胞或細(xì)菌:收集5×10^6個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌放入離心管中,用冷PBS洗滌細(xì)胞或細(xì)菌,離心后棄去上清液;加入1 mL提取緩沖液,在冰上超聲處理5分鐘(功率20%或200 W,超聲時(shí)間3秒,間隔時(shí)間7秒,重復(fù)30次)。以4°C下8,000 rpm離心10分鐘。使用上清液進(jìn)行測(cè)定。4.血清等液體樣品:直接進(jìn)行測(cè)試。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途
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