Sepdex G25是一種凝膠過濾介質, 利用凝膠的孔徑大小,實現不同分子量的物質的分離和純化。以葡聚糖為基質的凝膠過濾層析介質，其工作原理主要是利用具有多孔網狀結構的葡聚糖凝膠的分子篩作用，根據被分離樣品中各組分相對分子質量大小的差異進行分離。

艾美捷Sephadex G25，葡聚糖凝膠G-25：

目錄號：C-BETB002

尺寸：

1.樹脂：10mL、50mL、100mL、250mL、500mL、1L；

2.預包裝柱：5mL柱

儲存：20%乙醇或0.01M NaOH，4-30°C

Sephadex G25，葡聚糖凝膠G-25應用實例：

色譜柱：XK16/30脫鹽柱，柱高25cm（Sephadex G25M）。

平衡緩沖液：20mM PB+150mM NaCl，pH 7.0，通過0.45μm過濾器過濾。

流速：2 mL/min。

柱平衡：將色譜柱連接到純化儀器上，用2-3柱體積（CV）的平衡緩沖液洗滌脫鹽柱。

樣品裝載：添加1 mL樣品，為了極大限度地延長色譜柱的使用壽命，樣品應在裝載前進行澄清，例如以10000 g離心10分鐘或通過0.45μm過濾器過濾。洗脫：使用不超過建議zui大流速的流速，用平衡緩沖液洗滌脫鹽柱至少2 CV。

柱填料

1.凝膠懸浮液的制備

計算所需膨脹介質的量（每1L柱床體積約1.15 kg沉淀凝膠）。例如，對于床高為10cm的16/20柱，膨脹介質的所需量為

πx（1.6/2）2×10×1.15=23.11g。在干凈的燒杯中稱取23.11g介質，并加入一定量（例如，12mL）的包裝溶液。攪拌形成均勻的凝膠懸浮液。

2.柱填料

2.1檢查色譜柱，確保所有成分完好無損、清潔。安裝底部玻璃料，擰緊O型環，并將立柱垂直固定在鐵支架上。使用水準儀檢查并調整立柱使其水平。

2.2向色譜柱中加入適量的填料溶液以除去空氣。擰上底部塞子，在柱中留下1-2cm的填充溶液。

2.3使用玻璃棒沿柱內壁引導凝膠懸浮液，并連續傾倒，以最大限度地減少氣泡的產生。讓介質自然沉淀，直到體積不再變化，此時，介質和溶液將形成不同的層，上層完-全透明。

2.4將頂部玻璃料連接到低壓色譜系統，并以一定的流速啟動泵，以清除管道中的任何殘留空氣。暫停系統，將頂部玻璃料安裝到柱上，玻璃料的底端高于凝膠表面約1厘米。擰緊O形環并以300-500 cm/h的流速泵送色譜柱，直到床體積不再變化。繼續包裝5-10分鐘，并用記號筆標記凝膠表面的位置。

2.5暫停系統，擰上底部插頭，斷開立柱與泵的連接，向下旋轉調節桿，使其停止在標記位置下方0-0.5 cm處。擰上頂部塞子以完成柱填料。

3.清潔和再生

就地清潔是為了去除變性蛋白質、脂蛋白或脂質。常用的清洗溶液包括0.2 M NaOH或非離子洗滌劑，柱應使用2-3 CV清洗。

4.儲存條件

室溫下儲存在20%乙醇或0.01M氫氧化鈉中。