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內切酶EcoRI, 無動物源性背景:
經過基因工程改造的EcoRI,ADCF,能夠在5~15分鐘內消化DNA。它可用于鑒定質粒DNA、PCR產物和基因組。EcoRI,ADCF具有以下特點:在5到15分鐘內快速消化,極-好的酶活性冗余,易于處理底物過量或具有挑戰性的模板消化。這種酶不含動物來源的成分
艾美捷內切酶EcoRI, 無動物源性:
Cat #: C-BSM2504S
Size: 5000 U
Storage: -20°C
內切酶EcoRI, 無動物源性組成:
單位定義:
一個單位定義為在37°C、50µL推薦反應緩沖液中1小時內消化1µgλDNA所需的EcoRI量
熱滅活
在80°C下培養20分鐘。
質量控制
凈化
SDS-PAGE檢測結果大于95%。
核酸內切酶殘基
將20U的EcoRI與超螺旋質粒DNA在37°C下孵育4小時,DNA電泳中未檢測到質粒的變化。
藍/白篩選試驗:
用1μl EcoRI消化含有locZa基因的合適載體。將消化產物連接并轉化到大腸桿菌感受態細胞中。在含有X-Gal、IPTG和適當抗生素的Luria Bertani培養板上,成功門控的β-半乳糖苷酶基因可以表達并產生藍色菌落,而中斷的基因(即降解的DNA末端)產生白色菌落。ADCF限制性內切酶必須產生少于1%的白色菌落。
DNA酶殘基
將20U的EcoRI與雙鏈DNA在37°C下孵育16h,DNA電泳未檢測到DNA的變化。
RNase殘基
將20U的EcoRI與RNA在37℃下孵育1小時,電泳中未檢測到RNA降解
結扎和清算
在最佳反應溫度下用20U的EcoRI消化后,DNA片段可以在22°C下與T4 DNA連接酶(Fast)連接。在這些連接的片段中,通過瓊脂糖凝膠電泳測定,大多數片段可以用EcoRl重新切割。
宿主DNA殘基:
通過對大腸桿菌16S rDNA特異性的TaqMan-qPCR檢測酶溶液中的核酸殘基,檢測到少于10pg的大腸桿菌基因組殘基。
宿主蛋白殘留:
通過ELISA測定大腸桿菌宿主蛋白低于50ppm。
無菌:
未檢測到大腸桿菌。
內毒素殘留量:
<10 EU/mg
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