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簡析氨基酸分析儀的原理和操作步驟

閱讀:5517      發布時間:2022-6-10
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  氨基酸分析儀是進行氨基酸分離、衍生和檢測的全自動化專用分析儀器,廣泛用于醫藥、食品、飼料、農業、育種、醫學研究和地質考察等領域。根據柱后衍生原理設計而成,分為水解蛋白分析系統和生理體液分析系統,符合國際標準和國際仲裁標準。
 
  氨基酸分析儀的測定原理是利用樣品各種氨基酸組分的結構不同、酸堿性、極性及分子大小不同,在陽離子交換柱上將它們分離,采用不同pH值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來,再逐個以路的茚三酮試劑混合,然后共同流至螺旋反應管中,于一定溫度下(通常為115~120℃)進行顯色反應,形成在570nm有最大吸收的藍紫色產物。
 
  氨基酸分析儀的操作步驟
 
  1、樣品處理
 
  (1)測定樣品中各種游離氨基酸含量,可以除去脂肪雜質后,直接上柱進行分析。
 
  (2)測定蛋白質的氨基酸組成時樣品必須經酸水解,使蛋白質*變成氨基酸后才上柱進行分析。
 
  2、樣品分析
 
  經過處理后的樣品上柱進行分析。上柱的樣品量根據所用自動分析儀的靈敏度來確定。一般為每種氨基酸0.1μmol左右。測定必須在pH5~5.5、100℃下進行,反應進行時間為10~15min,生成的紫色物質在570nm波長下進行比色測定。而生成的黃色化合物在440nm波長下進行比色測定。做一個氨基酸全分析一般只需1h左右,同時可將幾十個樣品一起裝入儀器,自動按序分析,最后自動計算給出精確的數據。

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