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NCI-H520人肺鱗癌細胞
細胞介紹
NCI-H520細胞系是由A.F. Gazdar和他的同事在1982年從一名肺鱗狀細胞carcimoma患者的肺標本中提取的。
細胞特性
1） 來源：肺癌
2） 形態：貼壁，上皮細胞樣，多角形，緊密排列
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3） 將T25瓶中的細胞培養基離心后，去上清，添加6ml*培養基，加入新的T25瓶中繼續培養。
4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%，即可進行傳代培養。
注：*次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類；
1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。
2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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