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NMT發現GSNOR通過調控K+穩態增強植物對銨毒的耐受性

閱讀:422        發布時間:2021-5-19

基本信息

主題:NMT發現GSNOR通過調控K+穩態增強植物對銨毒的耐受性

期刊:Journal of Experimental Botany

影響因子:5.908

研究使用平臺NMT植物營養創新平臺

標題:Induction of S-nitrosoglutathione reductase protects root growth from ammonium toxicity by regulating potassium homeostasis in Arabidopsis and rice

者:中科院南京土壤研究所李光杰、張琳、宋海燕

 

檢測離子/分子指標

K+

 

檢測樣品

擬南芥根成熟區(距根尖~2500 μm根表上的點)

 

中文摘要

銨(NH4+)對大多數植物的根系生長來說,在中等濃度水平下已經產生毒害作用,但根系對NH4+的耐受機制依然不甚清楚。本文報道了較高濃度的NH4+通過SNO1sensitive to nitric oxide 1/SOS4salt overly sensitive 4)基因途徑抑制K+的吸收,誘導NO的積累,從而抑制主根生長。NH4+也促進了根系GSNORS-亞硝基谷胱甘肽還原酶)的積累。過表達GSNOR提高了根系對NH4+的耐受性,而GSNOR的缺失會進一步誘導NO的積累,提高了SNO1/SOS4活性,從而降低了根系組織中K+含量,增強了根系對NH4+的生長敏感性。此外,GSNOR同源基因OsGSNOR在水稻銨耐性中同樣發揮相似作用。免疫印跡結果表明,銨誘導的GSNOR蛋白增加有賴于VTC1Vitamin C1)的功能,在vtc1-1突變體中,銨對GSNOR蛋白的誘導效應*喪失,導致根系過量的NO積累及嚴重的鉀離子穩態失衡,對NH4+毒性具有超敏性。在vtc1-1突變體中強化GSNOR基因,可以部分恢復vtc1-1突變體的銨耐性。本研究表明,GSNOR依賴于VTC1,通過抑制NO介導的組織K+的抑制來增加根系對NH4+的耐受性。

 

離子/分子流實驗處理

7日齡擬南芥,在010 mM NH4+的生長培養基中培養24 h

 

離子/分子流實驗結果

為了評估NO在高NH4+條件下對根部K+積累的作用,研究用NMT檢測了根部表皮細胞的凈K+流速。NH4+處理減少了Col-0nox1NO-overproducting mutant)的凈K+內流;然而,在對照和NH4+處理下,nox1K+內流都明顯低于Col-0(圖1),與K+含量分析一致。NOK+含量呈負相關,表明NO參與了NH4+抑制的擬南芥K+吸收過程。與Col-0對照組相比,NH4+處理下,sno1/sos4突變體K+內流速率同樣明顯降低(圖1

圖1. Col-0、nox1sno1/sos4根系成熟區的凈K+流速

圖2. 擬南芥根成熟區K+檢測圖

其他實驗結果

 

  • NO至少部分通過增強SNO1/SOS4活性來促進NH4+抑制擬南芥K+吸收

  • nox1sno1/sos4中的K+吸收量較低不是由于NH4+吸收量較高所導致的

  • NH4+介導的NO增加和主根長的減少既不依賴于NOA1(Nitric Oxide-associated protein 1),也不依賴于NR(nitrate reductase)和NOS(NO synthase)

  • NH4+可以增強GSNOR蛋白的積累

  • GSNOR負調控NO水平,利于根系的K+穩態和NH4+耐受性

  • VTC1參與調控GSNOR蛋白積累,但對其響應NH4+的基因轉錄沒有太大影響

  • NH4+在蛋白水平上調節VTC1的積累

  • GSNOR在VTC1下游發揮作用,調節NO和根系對NH4+的響應

  • OsGSNOR有助于調節水稻根系的K+平衡和對NH4+的耐受性

 

結論
 

綜上,研究對GSNOR積累在植物NH4+耐受性中的作用提出了一個模型(圖3):在較高濃度外源NH4+供應下,NH4+通過“競爭”機制從K+通道進入組織(部分通過其他通道進入組織)。NH4+誘導的NO積累不是通過傳統的NR途徑發生的。根部的NO水平和SNO1/SOS4明顯增加,并參與抑制了NH4+條件下K+吸收和主根生長。同時,NH4+誘導的GSNOR起到補償作用,部分拮抗銨條件下NO的過度積累,保護根系在NH4+條件下的生長。雖然,NH4+誘導GSNOR的確切機制仍有待解決;然而,在NH4+下與VTC1相關的GSNOR蛋白調節可能是信號轉導途徑的一個組成部分。本研究的結果為VTC1和GSNOR如何相互作用以調節NH4+耐受性提供了新見解。在水稻中也發現GSNOR調節的NH4+耐受性,水稻是生長在以NH4+為主要氮形態的土壤中,深入研究植物體內NH4+與NO信號通路相互作用的機制,將有助于更全面地了解植物如何對不同程度的NH4+脅迫做出響應,并有助于制定提高作物NH4+耐受性的策略

圖3. GSNOR在植物NH4+耐受性中的作用模型。

測試液

1 mM K+, 10 mM NH4+

儀器采購信息

  • 據中關村NMT產業聯盟了解,中國科學院南京土壤研究所于2017年采購了美國揚格公司的非損傷微測系統。

 

關鍵銨脅迫;一氧化氮;鉀;根系生長;S-亞硝基谷胱甘肽還原酶(GSNOR);維生素C1VTC1

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