大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒

產(chǎn)品簡介：

樣本類型：血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本

檢測方法：雙抗夾心法

儲藏及保存：2-8度，6個月

檢測原理：

將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體，將未結合的抗體洗凈后再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

產(chǎn)品內容：

實驗所需儀器及設備：

實驗操作流程：

第一步：試劑盒室溫平衡 30min ，然后從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

第二步：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。

第三步：樣本孔中加入待測樣本 50μL；空白孔不加。

第四步：除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

第五步：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

第六步：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

第七步：每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值。

注：

大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!