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技術(shù)文章

貓、狗內(nèi)源性對(duì)稱二甲基精氨酸(SDMA)定量測(cè)定試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

閱讀:3371          發(fā)布時(shí)間:2020-8-17

對(duì)稱二甲基精氨酸(SDMA)是一種甲基化的精氨酸。SDMA來(lái)自于L -精氨酸殘基的核內(nèi)甲基化,在蛋白水解后釋放到細(xì)胞質(zhì)中。SDMA由腎臟排出。

 

幾項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),每3只貓和每10只狗中就有1只可能在它們的一生中患上腎病。

 

SDMA是腎臟功能的早期生物標(biāo)志物。它與腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)有很好的相關(guān)性。平均而言,腎功能喪失30 - 40%的慢性腎病(CKD)患者中,SDMA增加。然而,直到75%的腎功能喪失,肌酐才會(huì)增加。獸醫(yī)檢測(cè)SDMA將比肌酐或胱抑素C測(cè)試更早地診斷慢性腎臟疾病(CKD)。

 

SDMA對(duì)腎功能有特異性。不受肝病、心血管疾病、炎癥、內(nèi)分泌疾病等疾病的影響。SDMA另一個(gè)令人興奮的特點(diǎn)是它也不受肌肉質(zhì)量的影響,這簡(jiǎn)化了對(duì)瘦的老年動(dòng)物,特別是貓和患有其他導(dǎo)致肌肉萎縮疾病的動(dòng)物CKD的診斷和監(jiān)測(cè)。

 

競(jìng)爭(zhēng)性的SDMA-ELISA試劑盒采用微孔板檢測(cè)。SDMA與微孔板的固相結(jié)合。樣品中的SDMA被?;⑴c固相結(jié)合的SDMA競(jìng)爭(zhēng)固定數(shù)量的兔抗SDMA抗血清結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)時(shí),通過(guò)洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗血清復(fù)合物。通過(guò)抗兔/過(guò)氧化物酶檢測(cè)與固相SDMA結(jié)合的抗體。在450 nm處檢測(cè)底物TMB /過(guò)氧化物酶反應(yīng)。與固相SDMA結(jié)合的抗體量與樣品中SDMA濃度成反比。

 

 

加樣方案

樣本準(zhǔn)備

 

標(biāo)準(zhǔn)品

質(zhì)控品

樣本

標(biāo)準(zhǔn)品1-6  (μL)

20

 

 

質(zhì)控品1和2 (μL)

 

20

 

樣本(μL)

 

 

20

?;彌_液

(μL)

20

20

20

平衡試劑

(μL)

200

200

200

 

板子在定軌振蕩器上振蕩10s

?;噭?/span>

(μL)

50

50

50

 

定軌振蕩器室溫孵育20分鐘
每樣20μL用于ELISA試驗(yàn)。

ELISA加樣方案

 

標(biāo)準(zhǔn)品

質(zhì)控品

樣本

標(biāo)準(zhǔn)品1-6(μL)

20

 

 

質(zhì)控品1和2(μL)

 

20

 

樣本(μL)

 

 

20

抗血清(μL)

50

50

50

蓋上板膜在定軌振蕩器上室溫孵育90分鐘

洗板4次,每次用300μL洗液

結(jié)合物(μL

100

100

100

在定軌振蕩器上室溫孵育30分鐘

洗板4次,每次用300μL洗液

 

底物液(μL

100

100

100

在定軌振蕩器上室溫孵育25±5分鐘

終止液(μL

100

100

100

讀取450nm波長(zhǎng)吸光度

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