化工儀器網
技術文章
促甲狀腺激素受體抗體檢測（TRAb ELISA法）
閱讀：6063 發布時間：2018-5-22：歐洲1021721 B1，美國6844162 B1，日本4331403
注冊證號：國械注進20152403732
臨床意義：
TRAb也稱促甲狀腺激素（TSH）受體抗體，是鑒別甲亢、診斷Graves病的指標之一；TRAb對Graves病的診斷、治療和預后的估計均具有重要的意義；Graves病患者TRAb陽性率可達95%以上，故可作為Graves病的診斷依據。
臨床癥狀：
（1）本病多見于女性，以20-40歲者多見；
（2）典型的臨床表現主要包括高代謝癥、甲狀腺腫大和眼病三個方面；
（3）患者血清中存在多種自身抗體，特別是針對TSH受體的甲狀腺刺激抗體，與Graves病的甲狀腺功能亢進有關。
GRAVES病發病機理：
試劑盒檢測原理：
在使用生物素標記的促甲狀腺激素（TSH）與TRAb競爭結合TSH受體（TSHR）基礎上，加入生物素-鏈霉親和素-過氧化物酶反應機制。
產品特點：特異性99%，靈敏度98%，臨界值1U/L（NIBSC90/672）
應用范圍：各省、市級醫院均可開展
適用科室：檢測科，內分泌科，核醫學科
適用儀器：酶標儀（波長450nm）
采用標本：血清
產品規格：96人份/盒
儲存條件及有效期：2-8℃保存，有效期一年
檢測流程：
| 所有試劑和樣本在使用前均應達到室溫（20-25℃） | |
| 加樣： | 每孔加75ul 初始緩沖液（除去空白孔） |
| 加樣： | 每孔加75ul 標準品、對照和患者血清（除去空白孔） |
| 孵育： | ELISA 板振蕩器上室溫孵育2小時（500次/分） |
| 棄去反應液： | 微孔板 |
| 洗滌： | 洗板一次（如手工洗版，洗板后應倒置在吸水紙上拍干） |
| 加樣： | 每孔中加入100ul TSH-生物素（復溶）（除去空白孔） |
| 孵育： | 室溫放置25分鐘，無需振蕩 |
| 棄去反應液： | 微孔板 |
| 洗滌： | 洗板一次（如手工洗版，洗板后應倒置在吸水紙上拍干） |
| 加樣： | 每孔加入100ul SA-POD（1:20稀釋）（除去空白孔） |
| 孵育： | 室溫放置20分鐘，無需振蕩 |
| 棄去反應液： | 微孔板 |
| 洗滌： | 洗板3次（如手工洗版，則用稀釋好的洗液洗2次，純水洗1次，洗板后應倒置在吸水紙上拍干） |
| 加樣： | 每孔加入100ul TMB(包括空白孔) |
| 孵育： | 避光室溫放置30分鐘，無需振蕩 |
| 加樣： | 每孔加入50ul 終止液（包括空白孔），振蕩5秒鐘 |
| 讀數： | 450nm下讀取吸光度 |
| 不要在室溫25℃以上進行該試驗。 | |