詳細介紹
商品介紹:
GSK1059615是PI3Kα/β/δ/γ可逆的抑制劑,同時也抑制mTOR,IC50值分別為0.4nM/0.6nM/2nM/5nM和12nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:958852-01-2 純度:98.91% 分子量:333.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)
英文名稱:GSK1059615
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
粗糙鏈孢霉*Alcanivorax dieselolei
棒狀乳桿菌棒狀亞種Microbacterium oxydans
硬結節桿菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus
甜菜蛇眼病莖點霉Marinobacter hydrocarbonoclasticus
布氏假單胞菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus
耐久腸球菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus
棲河菌屬Bacillus barbaricus
多主葡萄殼菌Citricoccus alkalitolerans
楷米干酪菌Idiomarina seosinensis
黑木耳Idiomarina seosinensis
中慢生華癸根瘤菌Rhodococcus phenolicus
食砜節桿菌Halomonas venusta
戊糖乳桿菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus
桃木腐層孔菌Halomonas venusta
實腐莖點霉Halomonas venusta
交鏈孢Halomonas alimentaria
豬早老1(PS-1)免疫試劑盒乙酰羧化抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) 白果雙黃
豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒磷化乙酰羧化抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) 白果
豬載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒磷化Ack1抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) 白果新
豬載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) 白花前胡
PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)SERINC3 英文名稱: 絲酸合并蛋白3抗體(差異表達蛋白) 0.2ml
Echidnotoxin 英文名稱: 蝮蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml
生長抑素受體1抗體 Anti-SSTR1 0.2ml
Anti-RALDH2/FITC 熒光素標記視黃醛脫氫酶2型抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 磷酸化轉化生長因子β活化激酶結合蛋白1抗體 規格 0.1ml
Aurora B 極光激酶B抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg