詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Deltarasin | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Deltarasin是一種KRAS-PDEδ相互作用的抑制劑,能夠與PDEδ結合,Kd值為38nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1440898-61-2 純度:95.95% 分子量:603.75 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
大腸埃希氏菌FOS樣抗原2Anti-CLDN19 Antibody人可溶性粘附分子(Sam)
釀酒酵母叉頭蛋白F1抗原Anti-CLDN3 Antibody人可溶性粘附分子(Sam)
香菇插頭蛋白J1抗原Anti-CLDN5 Antibody人巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)
大腸埃希氏菌FoxP1(T轉錄因子)抗原Anti-CLDN3 Antibody人巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)
英諾克李斯特氏菌插頭蛋白M1抗原Anti-CLDN6 Antibody人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)
相思根瘤菌麻疹病抗原(麻疹病融合蛋白)Anti-CLDN7 Antibody人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)
澳型核果褐腐病菌促卵泡激受體抗原Anti-CLEC11A Antibody人胸腺基質淋巴生成(TSLP)
凱斯特鞘單胞菌促卵泡激抗原Anti-CLDN8 Antibody人胸腺基質淋巴生成(TSLP)
山藥枯萎病γ1基丁A型受體α1抗原Anti-CLEC3B Antibody人穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)
HIV假病 18A-41g-基丁B1受體(多肽)Anti-CLIC3 Antibody人穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)
短波單胞菌屬γ1基丁A型受體B2抗原Anti-CLEC4M Antibody人多效生長因子(PTN)
明尼蘇達被毛孢谷脫羧-67抗原Anti-CLEC4A Antibody人多效生長因子(PTN)
澳型核果褐腐病菌生長抑制DNA損傷基因153抗原Anti-CLIP2 Antibody人可溶性CD28(sCD28)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種磷化神經生長相關蛋白43抗原Anti-CLIC6 Antibody人可溶性CD28(sCD28)
纖細正青霉3-磷甘油脫氫(人)抗原Anti-CLIP3 Antibody人淋巴因子
紡織品 特種動物纖維含量 (綿羊毛與山羊絨)表面趨化因子受體3抗原Anti-CLK2 Antibody人淋巴因子
腺苷單磷活化蛋白激γ2抗體魯氏接合酵母人神經膠質瘤細胞
富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體莫格球擬酵母小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾)
磷酯Cβ1抗體紅平紅球菌人高轉移肺癌細胞
PRPF4蛋白抗體放射性根瘤菌小鼠前胃癌細胞
KRAS-PDEδ抑制劑(Deltarasin)草螺 2,3,23-三羥基-12-齊墩果烯-28-酸
金頂側耳 2''-Acetylastragalin
金針菇 24,25-Dihydroxycycloartan-3-one
大腸埃希氏 22-脫氫赤桐甾葡糖苷
豬瘟活疫苗(兔源)國家參考品 2',4'-Dihydroxy-3',6'-dimethoxyc
蟬花 2,3',4,6-Tetrahydroxybenzophenon
柞蠶鏈球 2,3,2",3"-Tetrahydroochnaflavone
硝酸鹽還原 2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16-貝殼杉烯二
棒曲霉 2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16,19-貝殼杉烯三
藤黃孢鏈霉 1-O-Deacetylkhayanolide E
地衣芽孢桿 1-O-Deacetyl-2α-hydroxykhayanoli
Pseudomonas 1-Hydroxy-2-oxopomolic acid
硫磺 19-羥基漿果赤霉 III
大腸埃希 16-Epinormacusine B
枯草芽孢桿 15-甲氧基松柏酸