詳細介紹
商品介紹:
MBP146-78是有效的選擇性的cGMP依賴的蛋白激酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:188343-77-3 純度:99.19% 分子量:335.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MBP146-78 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
青陽參苷元A(標準品)英文名稱: β-Carotene微管相關蛋白4抗體包裝1g
青陽參苷元B(標準品)英文名稱: Sesamoside26S蛋白調節亞型7抗體包裝250mg
氫檳榔堿(標準品)英文名稱: Trigonelline Hydrochloride蛋白酪磷非受體型4抗體包裝1g
氫東莨菪堿(標準品)英文名稱: Cucurbitacin B腦腸肽O?;D移抗體包裝5g
氫高烏(標準品)英文名稱: Quercitrin轉錄調控因子MRG15抗體包裝10MG
苘麻子(標準品)英文名稱: Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體包裝25g
秋仙堿(標準品)英文名稱: XanthotolT淋巴成熟相關蛋白抗體包裝5g
曲克蘆?。藴势罚┯⑽拿Q: Sophocarpine基二尿癥cblA抗體包裝100g
驅蟲斑鳩菊(標準品)英文名稱: Alismoxide非平滑肌肌球蛋白2A抗體包裝500g
去斑蝥(標準品)英文名稱: PhellodendrineDNA修復基磺敏感性基因19抗體包裝100g
去斑蝥(標準品)英文名稱: Obacunone 19號染色體開放閱讀框28抗體包裝25g
去斑蝥鈉(標準品)英文名稱: Glycitin珠蛋白1抗體包裝5g
去烏藥堿鹽鹽(標準品)英文名稱: Glycitein肌紅蛋白抗體包裝100g
去氧基姜黃英文名稱: Diosbulbin B錯配修復蛋白6抗體包裝25g
去氧基姜黃(標準品)英文名稱: Coptisine珠蛋白2抗體包裝500g
高地芽孢桿菌Bacillus│altitudinis 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養抗弓形體試劑盒丹參酚B酯;Monomethyl l
產黃青霉Penicillium│chrysogenum 質量規格:>99%,美國進口sc-202975抗肝膜抗體試劑盒杜鵑;farrerol
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規格:HPLC≥98.0%抗肝胞質1型抗體試劑盒酰 ;Cannabisin A
cGMP依賴蛋白激酶抑制劑(MBP146-78)脂質磷磷相關蛋白1/可塑性相關因3抗體蓮心(標準品) D-Tetrahydropalmatine
神經突觸粘附樣分子1抗體麥冬二氫高異黃A,麥冬黃烷A 4-Bromobenzylamine
富含亮重復家庭蛋白1抗體麥冬黃A(標準品) Ganoderenic acid B
富含亮重復家庭蛋白4抗體麥冬黃烷B Tetrahydropalmatine
瘦受體抗體(長)溴東莨菪(標準品) Tetrahydropalmatine
白血病抑制因子抗體假人參皂苷RT1 Pregnenolone Acetate
Nogo受體反應蛋白抗體見血飛(標準品) Pregnenolone Acetate
凋亡抑制蛋白抗體劍麻皂苷元(標準品) Chitosan
層粘連蛋白抗體箭根薯(標準品) Chitosan