化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ML264 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
商品介紹：
ML264是KLF5的抑制劑，可以通過降低EGR1and KLF5的表達抑制MAPK信號通路。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1550008-55-3 分子量：384.88 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
球孢白僵菌Saccharomyces cerevisiae
間型彎孢Debaryomyces hansenii
金耳Debaryomyces hansenii
芽孢桿菌屬Candida famata
假鳥腸球菌Debaryomyces hansenii
就地堆肥地芽孢桿菌Debaryomyces hansenii
耐鹽海桿菌Debaryomyces hansenii
釀酒酵母Debaryomyces hansenii
傳染性法氏囊病病Debaryomyces hansenii
灰毛青霉Debaryomyces hansenii
厚基肉座菌Debaryomyces hansenii
球形芽孢桿菌Debaryomyces hansenii
葡萄座腔菌Debaryomyces hansenii
類芽孢桿菌屬Debaryomyces hansenii
長谷川赤擔孢酵母Debaryomyces hansenii
雞傷寒沙門氏菌Debaryomyces hansenii
小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒磷化絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體人抗BP180抗體(BP180-Ab) 女貞苷
小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒肌動蛋白相關蛋白2/3亞型1A抗體人抗BP180抗體(BP180-Ab) 諾
小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒錨蛋白重復結構域蛋白32抗體人抗BB抗體(BB-Ab) 諾米林
小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒共濟失調7樣蛋白3B抗體人抗BB抗體(BB-Ab) 歐當歸內酯A
KLF5抑制劑(ML264)SRD5A1 英文名稱： 類固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1) 0.1ml
ENTPD2 英文名稱： CD39樣蛋白1抗體 0.2ml
端粒體復制結合因子1抗體 Anti-TRBF1 1ml
Anti-TRAF6 /FITC 熒光素標記壞死因子受體相關因子6抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規格 0.1ml
RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維甲酸受體-α 多肽Multi-class antibodies規格： 0.5mg
化工儀器網