詳細介紹
商品介紹:
M-110是Pim激酶抑制劑,抑制前列腺癌細胞系增殖IC50為0.6-0.9uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1395048-49-3 分子量:445.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
M-110 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希菌Bergeyella zoohelcum
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌Bifidobacterium bifidum
大腸埃希菌Bifidobacterium bifidum
短小桿菌屬Bifidobacterium bifidum
分枝節(jié)桿菌Bifidobacterium bifidum
球孢白僵菌Bifidobacterium longum subsp. longum
大孢鏈格孢菌Bifidobacterium longum subsp. longum
ZhihengliuellaBifidobacterium longum subsp. longum
假絲酵母屬Bifidobacterium pseudocatenulatum
Ag-12(蘑菇)Bifidobacterium pseudocatenulatum
漿孢毛霉Bosea thiooxidans
青春雙歧桿菌Bosea thiooxidans
釀酒酵母Bowmanella pacifica
鏈霉菌Brachybacterium faecium
無花果曲霉Brachybacterium paraconglomeratum
枯草芽孢桿菌Brachybacterium paraconglomeratum
小鼠載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒活化復制因子2抗體人白活化黏附因子(ALCAM)二乙酰基大花旋覆花內酯
小鼠孕激/孕(PROG)免疫試劑盒腺苷單磷活化蛋白激β1抗體人白活化黏附因子(ALCAM)法林二
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)IgM抗體免疫試劑盒糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽抗體人活化A(ACV-A)番茄紅
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒血管緊張Ⅱ抗體人活化A(ACV-A)番茄堿
Pim激酶抑制劑(M-110)ZNF3 英文名稱: 鋅指蛋白3抗體 0.2ml
DERLIN-1 英文名稱: 細胞膜蛋白Derlin抗體 0.2ml
血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗體 Anti-Agtr1/AT1a 0.1ml
Anti-XBP-1/FITC 熒光素標記細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg