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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PF-2771 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
商品介紹：
PF-2771是一種有效的選擇性CENP-E抑制劑,PF-2771抑制CENP-E活性,IC50值為16.1±1.2nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 分子量：554.08 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
釀酒酵母Derxomyces anomala
反硝化芽生桿菌Bullera hubeiensis
短波單胞菌Bullera nakasei
金福菇Hannaella kunmingensis
平菇2000（京瑞）Bensingtonia changbaiensis
果生核盤菌Candida tibetensis
泡盛曲霉Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
橢孢小隔指孢Candida utilis
奧托氏菌屬Sporobolomyces roseus
平臍蠕孢菌Saccharomyces cerevisiae
佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
扣囊內孢霉Saccharomyces cerevisiae
李色螺旋鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
類芽胞桿菌Candida linzhiensis
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab) 牛蒡苷元
小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒精加壓受體2抗體人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab) 牛蒡子苷
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒凋亡相關斑點樣蛋白ASC抗體人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) 牛磺膽鈉
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) 牛磺鵝去氧膽
CENP-E抑制劑(PF-2771)SERPINB1 英文名稱： 絲酸蛋白酶抑制劑B1抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser695) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
抑癌基因p16抗體 Anti-P16/CDKN2A 0.1ml
Anti-SOD2/FITC 熒光素超氧化物歧化酶2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NIPA(Ser354) 磷酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 規格 0.1ml
CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質激素釋放因子Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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