詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
EHop-016 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
EHop-016是Rac GTPase高效選擇性抑制劑,在MDA-MB-435細胞中IC50值1.1uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1380432-32-5 純度:98.91% 分子量:430.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
澳型核果褐腐病菌Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides大鼠維生D2(VD2)
FibrellaLeuconostoc lactis大鼠維生E(VE)
鯉鏈霉菌Leuconostoc citreum大鼠維生E(VE)
釀酒酵母Lactobacillus rhamnosus大鼠維生A(VA)
山夫頓堡沙門氏菌Lactobacillus acidophilus大鼠維生A(VA)
匍匐曲霉原變種Lactobacillus casei大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)
大杯香菇Lactobacillus plantarum大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)
解脂假絲酵母Lactococcus lactis大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)
解淀粉芽孢桿菌Streptococcus thermophilus大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)
Rathayibacter caricisLactococcus lactis subsp. lactis大鼠雙氫睪(DHT)
棒黃曲霉Pediococcus dextrinicus大鼠雙氫睪(DHT)
靈芝Lactobacillus delbrueckii大鼠結締組織生長因子(CTGF)
雞腿菇cc968Streptococcus sp.大鼠結締組織生長因子(CTGF)
越桔假絲酵母Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum大鼠抗抗體(AsAb)
黑曲霉Propionibacterium acidipropionici大鼠抗抗體(AsAb)
釀酒酵母Enterococcus faecium大鼠甲狀旁腺激(PTH)
視黃結合蛋白抗體密褐褶菌西唐北里孢菌
軸突導向受體蛋白2抗體假芝纖維鏈霉菌
復制激活因子C1抗體皂味口蘑小單孢菌FIM98-0125
鋅指蛋白754抗體松生擬層孔菌(紅緣擬層孔菌)柱銹耳屬
Rac GTPase抑制劑(EHop-016)光帽鱗傘 L-核糖
小腸腸球 白花前胡
大腸埃希氏 酵母聚糖A
高加索鏈霉 花椒
木紫芝 癸基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷
灰號角 常春藤皂苷元
蠟樣芽胞桿 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷
希氏乳桿(希爾加德氏乳桿) D-松
杜搟氏 粘液酸
奇異變形 3-基-β-D-吡喃葡萄糖苷酸環己鹽
蘇云金芽胞桿蘇云金變種 3-基-β-D-吡喃葡萄糖苷
交鏈孢 可可堿
小單孢 3-基-β-D-吡喃半乳糖苷
葡萄座腔 10-羥基
鹽紅 十二烷基-β-D-麥芽糖苷