詳細介紹
商品介紹:
SMI-16a是選擇性的Pim激酶抑制劑,對Pim1,Pim2和PC3細胞的IC50值分別為0.15,0.02和48μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:587852-28-6 別名:PIM1/2 Kinase Inhibitor VI 純度:98.0% 分子量:263.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SMI-16a | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
前動力蛋白2(PK2)ELISA Kit英文名稱:PK2 ELISA Kit周期依賴性激7抗體包裝1g
前蛋白轉化枯草溶菌9(PCSK9)ELISA Kit英文名稱:PCSK9 ELISA Kit周期依賴性激8抗體包裝25g
葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)ELISA Kit英文名稱:GLUT4 ELISA Kit周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體包裝5g
葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)ELISA Kit英文名稱:GLUT2 ELISA KitⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝1g
葡萄糖苷β(GUSβ)ELISA Kit英文名稱:GUSβ ELISA Kitc-fos抗體包裝25g
葡萄糖6磷異構(GPI)ELISA Kit英文名稱:GPI ELISA Kit嗜鉻粒A抗體包裝5g
平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)ELISA Kit英文名稱:ACTα2 ELISA KitCGRP降鈣基因相關肽抗體包裝500mg
皮質(CORT)ELISA Kit英文名稱:CORT ELISA KitChAT膽堿乙酰轉移抗體包裝1g
皮質結合球蛋白(CBG)ELISA Kit英文名稱:CBG ELISA Kit周期蛋白N端結構域蛋白2抗體包裝5g
皮膚橋蛋白(DPT)ELISA Kit英文名稱:DPT ELISA Kit肌動蛋白結合蛋白CORO1A抗體包裝1g
旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA Kit英文名稱:PPL ELISA Kit抗菌肽/天蠶抗體包裝5g
紐蛋白(VCL)ELISA Kit英文名稱:VCL ELISA Kit鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激IG抗體包裝25g
牛血清白蛋白(BSA)ELISA Kit英文名稱:BSA ELISA Kit表面趨化因子受體8抗體包裝5g
Ⅻ(F12)ELISA Kit英文名稱:F12 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝250mg
ⅩⅢB肽(F13B)ELISA Kit英文名稱:F13B ELISA Kit胱硫γ裂解抗體包裝1g
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質量規格:HPLC>98%,標準品腫瘤壞死因子受體相關因子6試劑盒植鋅;Zinc Phytate
假結核耶爾森氏菌Yersinia│pseudotuberculosis 質量規格:>98% 腫瘤壞死因子受體相關因子1試劑盒植鈉;Sodium phytate
擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質量規格:HPLC>98% ,標準品腫瘤壞死因子受體超家族成員18試劑盒植鈣;Calcium phytate
Pim激酶抑制劑(SMI-16a)糖轉移8結構域1抗體姜黃(標準品) Fluazifop-P-butyl solution
環指蛋白27抗體姜(標準品) Famoxadone solution
透明質結合蛋白1抗體降二氫辣椒 Flufenoxuron
G蛋白偶聯受體激6抗體降香(標準品) Fomesafen
Rho GTP激活蛋白26抗體膠蒼術甙,羧蒼術苷二鹽(標準品) Flutolanil
G蛋白α抑制蛋白1抗體焦地黃乙甙A1 Flusilazole
生長停滯特異性蛋白6抗體焦地黃乙甙B1 Fipronil
谷胱甘肽合成抗體焦性沒食子(標準品) Fenobucarb
血型糖蛋白δ抗體絞股藍(標準品) Fenpyroximate