MEK和極光激酶(AK)雙重抑制劑(BI-847325)公司*的產(chǎn)品：Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG 小鼠抗羊IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
胃泌素/蛙

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MEK和極光激酶(AK)雙重抑制劑(BI-847325)

英文名稱：BI-847325

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

山丘鏈霉菌Candida melinii

耐久腸球菌Bullera pseudoalba

枯草芽孢桿菌Sterigmatomyces halophilus

交鏈孢Kockovaella thailandica

膨大彎頸霉Candida cacaoi

樟疫霉Candida fukuyamaensis

大腸埃希氏桿菌Candida friedrichii

布氏正青霉Bensingtonia ciliata

水生黃桿菌Sporobolomyces roseus

孟氏假單胞菌Sporobolomyces elongatus

腐生葡萄球菌Kurtzmanomyces nectairei

彩色豆馬勃Saccharomyces cerevisiae

坎氏弧菌Saccharomyces cerevisiae

豌豆根瘤菌Mrakia frigida

50876(茯苓 )Mrakia gelida

植物乳桿菌Mrakia nivalis

小鼠抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒腺苷環(huán)化10抗體人纖連蛋白(FN)化兩面針堿

小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒腺苷環(huán)化5抗體人纖連蛋白(FN)化矢車菊

小鼠抗抗體(AsAb)免疫試劑盒腺苷環(huán)化6抗體人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)天竺葵（化花葵）

小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)免疫試劑盒腺苷環(huán)化9抗體人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)化纈草
MEK和極光激酶(AK)雙重抑制劑(BI-847325)Phospho-MEK4 (Ser257 + Thr261) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體 0.1ml

EXTL2 英文名稱： 外生性骨疣樣蛋白2抗體 0.2ml

內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 Anti-Visfatin-1/PBEF1 hu、 mo、 rat、MK 0.1ml

Anti-TSH/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 規(guī)格 0.1ml

Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg