詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAK-438 free base | 1mL(10mM)|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
TAK-438(free base)是一種新型的鉀競爭性的酸阻斷劑,可逆抑制H+/K+,ATPase,IC50為19nM(pH6.5)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:881681-00-1 別名:Vonoprazan 純度:99.24% 分子量:345.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鹽拉貝洛爾(標準品)英文名稱: trans-Zeatin脫氫/還原家族成員2抗體包裝1g
鹽雷莫司瓊(標準品)英文名稱: Dipotassium tetrachloroplatinate牙本質磷蛋白抗體包裝25g
鹽雷尼替丁(標準品)英文名稱: CycloastragenolDermokine β蛋白抗體包裝5g
鹽(標準品)英文名稱: Aristolochic acid ADPCR1蛋白抗體包裝25g
鹽利托君(標準品)英文名稱: Purpurin表皮源性蛋白6抗體包裝5g
鹽林可霉(標準品)英文名稱: Jujuboside D雙特異性蛋白磷7抗體包裝1g
鹽硫必利(標準品)英文名稱: Pseduoprotodioscin雙特異性蛋白磷26抗體(絲裂原活化蛋白激磷8)包裝5g
鹽硫利達(標準品)英文名稱: Oxypaeoniflorin阿米洛利結合蛋白1抗體包裝1mg
鹽魯拉西(標準品)英文名稱: 3-isomangostinS期激活化蛋白DBF4A抗體包裝1g
那林(標準品)英文名稱: Naringin dihydrochalcone著絲粒相關蛋白DSN1抗體包裝5g
(標準品)英文名稱: Hygromycin B雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體包裝250mg
己定(標準品)英文名稱: Apiin 神經干樹突調節蛋白DAGLα抗體包裝25g
米帕明/咪(標準品)英文名稱: Chrysoeriol 7-O-glucoside對接蛋白4抗體包裝5g
丁(標準品)英文名稱: Kaempferol-3-O-rutinosideDULLARD蛋白抗體包裝100g
普魯(標準品)英文名稱: Pantoprazole Sodium絲/蘇蛋白激MNB抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98%,BR銅鋅-過氧化物岐化試劑盒三十烷;1-Triacontanol
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質量規格:HPLC>98%,標準品銅藍蛋白試劑盒雙去氧基姜黃;Bisdemethoxy
: JCM13192=CIP109020=KCTC22434=NBRC101534=NRRLB-41137資源名稱: Gramellaportivictoriae 質量規格:>99%,BR同源框A3試劑盒薯蕷皂苷;Dioscin
H+/K+,ATPase抑制劑(TAK-438 free base)小鼠小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體1桔梗皂苷元Human, Mouse
人CC趨化因子受體1桔梗皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Human, Mouse, Rat
魚類皮質桔紅;桔皮(標準品)Human
大鼠CD8分子菊花(標準品)Human
人CX3C趨化因子受體1菊苣(毛菊苣)(標準品)Human
魚類超敏C反應蛋白菊苣Human
兔核因子κB受體活化因子配菊苣(標準品)Human
小鼠高鐵血紅蛋白橘葉(標準品)Human, Mouse
兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白巨大戟(標準品)Human, Mouse, Rat